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如何确定原料药的有关物质的检测方法?

有关物质检查,包括对产品中残留合成原料、中间体、副产物及可能的降解产物的检查。
不同的物质紫外吸收也不一样,波长的选择很最重要。
先来说说我是怎么做的,希望大家能够补充,一起进步。
首先可以通过DAD考察起始原料、中间体及剧烈破坏的降解产物等的紫外特征。
若没有DAD可通过UV扫描起始原料、中间体等的紫外特征,选择杂质与原料相近的响应值处的波长为有关物质检查波长,并在不同波长下检测破坏试验的回收率,选择主药吸收较大且回收率较高的波长作为检测波长,对于存在响应相差较大的杂质,应采用加校正因子的自身对照法或者杂质对照品法。
再通过破坏试验考察专属性,验证方法的可靠性。通常的做法是:
1.酸降解试验  一般选择0.1N的盐酸,在室温或加热条件下进行考察。酸液的浓度、考察的温度与时间均可根据具体品种,在前期预试验的基础上灵活确定。 
2.碱降解试验  一般选择0.1N的氢氧化钠溶液,在室温或加热条件下进行考察。碱液的浓度、考察的温度与时间均可根据具体品种,在前期预试验的基础上灵活确定。  3.高温降解试验  可分别在固体和溶液状态下进行考察,具体的考察温度与时间均可根据具体品种,在前期预试验的基础上灵活确定。例如,可分别在60、80℃考察30天,或在130℃考察8小时。 
4.光降解试验  可分别在固体和溶液状态下进行考察,具体的光强度与考察时间可根据具体品种,在前期试验的基础上灵活确定。例如,可按照ICH的Q1B指导原则进行2个循环的考察:先经一百二十万勒克斯(Lx)×小时的冷白荧光灯照射,再经200瓦小时/平方米的紫外荧光灯照射。 
5.氧化降解试验  主要在溶液状态下进行考察,氧化剂可采用饱和的氧气或不同浓度的双氧水,分别在室温或加热条件下进行考察。
然后再对相应的杂质进行方法学验证,确定有关物质的检测方法。
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共51个回答
很不错

物料平衡 很难做呀
方法很难统一 况且物料平衡对于报批来讲比较重要但是很容易作假!想法是好 但是真正做好的没有多少
讲的不错,加一条,做专属性时,要计算物料平衡,才可说明分析方法的可行性
物料平衡确实是个很大的问题,在有关物质的方法验证中,这个一条就是最困难的了。但说道具体怎么做,还请指教!
物料平衡的计算: (破坏样品含量+总杂)/(未破坏样品含量+总杂)*100%
限度=95%-105%
API杂质研究,楼上降解的,只是其中一部分,不完全。其实完整考察,应该首先研究工艺过程中产生的杂质,方法学研究重点是中间体,起始物料,副反应杂质,粗品中杂质,以及高温,高湿和强光产生的杂质,这些杂质应该能检测出来,也就是波长的选择和色谱柱的选择很关键。
问题二:用90℃加热,水的沸点是100℃,你用90℃加热,可能还没到样品破坏,你的溶液-水,就都蒸发完了,还怎么加热破坏呢?而且,还要90℃加热24小时,难道你加入1000ml的水,溶解你的样品(需要称量1000mg固体原料药,一般杂质供试品浓度为1mg/ml),然后,等待加热24小时吗?还是,你每隔一段时间,就去补加已经蒸发的水呢?半晚上,不睡觉,也去补加水?

其实楼主说的包括2个方面:
1、首先楼主研究的样品是新药还是仿制类的,新药那就待自己找相关文献,方法待自己摸索,根据自己工艺里 的杂质(中间体、起始物料、副反应杂质)及样品进行强制降解产生的杂质,进行研究,确定分析方法。
2、仿制类的,看你仿制USP、EP、还是CHP等如果你仿制USP的话,你要合成或购买USP药典标准里的有关物质相关标准杂质进行SYS确认,并对自己工艺里 的杂质(中间体、起始物料、副反应杂质)及样品进行强制降解产生的杂质进行检测,确认相关杂质与主峰能很好的分离,达到SYS要求。
3、所有杂质的限度要大于对应杂质的LOD,这样你做的 其它项目(回收、线性、精密度、LOD\LOQ、应用等)才有意义。

个人见解   多讨论   
学习了,做合成的人也应该了解这些基本的分析方法啊!
对于杂质方法的建立,楼上的各位都是说了,关于理论方面,或大体思路方面的内容,这些内容实际上,做药物分析的人,基本都知道。但是,看完各位的叙述后,我依然不知道,具体应该怎么操作实验?
哪位专家,可以列举 ...
可参考
破坏试验
水破坏  取原料适量,加水溶解后,在90℃放置24小时。
氧化破坏  取原料适量,用5%过氧化氢溶液溶解后,在90℃放置24小时。
强碱破坏  取原料适量,用1mol/L氢氧化钠溶液溶解后,在90℃放置24小时。
强酸破坏  取原料适量,加1mol/L盐酸溶液溶解后,在90℃放置24小时。
高温破坏  取原料适量,依据各自品种的熔点不同,在高温下破坏至外观性状改变
强光破坏  取原料适量,置紫外灯下照射48小时。
1、首先楼主研究的样品是新药还是仿制类的,新药那就待自己找相关文献,方法待自己摸索,根据自己工艺里 的杂质(中间体、起始物料、副反应杂质)及样品进行强制降解产生的杂质,进行研究,确定分析方法。
2、仿制类的,看你仿制USP、EP、还是CHP等如果你仿制USP的话,你要合成或购买USP药典标准里的有关物质相关标准杂质进行SYS确认,并对自己工艺里 的杂质(中间体、起始物料、副反应杂质)及样品进行强制降解产生的杂质进行检测,确认相关杂质与主峰能很好的分离,达到SYS要求。
讲的不错,加一条,做专属性时,要计算物料平衡,才可说明分析方法的可行性
平衡了,说明你“运气好”;不平衡,说明正常。
对于杂质方法的建立,楼上的各位都是说了,关于理论方面,或大体思路方面的内容,这些内容实际上,做药物分析的人,基本都知道。但是,看完各位的叙述后,我依然不知道,具体应该怎么操作实验?
哪位专家,可以列举 ...
最后自己向你所在部门相关实验人员请教   做几次就没有什么了  
我们做有机合成的一般都是通过最基本的过柱子,点板,通过红外,不同物质爬板的高度不同来分辨是产物还是原料点,在进行处理,就可以了
你那是在学校吧,不适合生产的。
这个地方的物料平衡是指,A=未破坏的样品质量与响应值的比值
B=强制讲解试验样品质量与响应值和的比值,A/B约等于1,那么就物料平衡,不过讲解产物在那个波长下没有吸收,这就不成立啦……...
物料平衡的计算: (破坏样品含量+总杂)/(未破坏样品含量+总杂)*100%
限度=95%-105%

如果杂质与主峰的最大吸收不一致,校正因子超出0.9-1.1,可采用加校正因子的自身对照法来计算杂质。
“光降解试验  可分别在固体和溶液状态下进行考察”,就这一句话而言,如果样品是固体的,怎么选者容剂让其变为液体的,使用流动相,还是????
是指标准里溶解样品的溶剂(通常为流动相)
对于杂质方法的建立,楼上的各位都是说了,关于理论方面,或大体思路方面的内容,这些内容实际上,做药物分析的人,基本都知道。但是,看完各位的叙述后,我依然不知道,具体应该怎么操作实验?
哪位专家,可以列举一个具体操作的模板,或是操作流程。让那些不知道怎么做实验的人,看完后,就能一步一步的操作,并且最终得到合适的结果。
例如,怎么称量样品。稀释多少,取酸液、碱液多少,怎么配制,怎么破坏,怎么检查,怎么计算物理平衡呢?怎么样看色谱图,看色谱图中的什么数据,就知道,自己的实验室合格的呢?
你这里说的主要是降解试验啊。
其实方法是一个渐变的过程,脱离了工艺和杂质谱分析很可能会遗漏的啊。
还有那个说“物料平衡的”,真是忍不住要说一句了:真想问问你到底有没有好好动脑子深入思考过啊,奉劝一句做科研一定不能人云亦云,更不能走捷径,凡是要“有理有据”。
相关物质的检测方法,具体情况具体分析吧,楼主简单介绍了其中部分常识。
因为不是专门从事分析工作的,所以没有办法给具体心得。关于分析方法需要符合的要求,有兴趣的朋友可以找相关的指南学习,比如ICH
或者简单的,找本药典,看相关部分
一般的有关物质方法检查的建立 都是在的已有的文献资料的基础上进行对比考察,择其优者,并对方法进行适当的优化,
如果已有的文献资料不适合你的有关物质检查,你也可以自建分析方法。自建的话,是个比较有挑战性的工作,但是也是个学以致用的好机会。
关于楼上的破坏之类的可以归属于方法学验证的范畴,当然这也是方法建立之后对于初步方法的可行性的一个确认,尤其是物料平衡。
采用HPLC法,需采用峰面积法,具体定量方法有:
1.外标法(杂质对照品法),
2.加校正因子的主成分自身对照法,
3.不加校正因子的主成分自身对照法,
4.峰面积归一化法。
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