两个物质摸了很多条件分不开啊 分不开？

可调整流动相比例，梯度洗脱J型或S型梯度洗脱，减小流速试试。同时跟楼主请教一下，你的那个 分离度 是怎么得出来的？还有一般我看文献里也有说  塔板数 的，请问是怎么得到的，这边用的waters仪器，没见有相关参数。

你原来的色谱柱是哪家的呢？换个品牌的试试，有时出峰顺序都会改变很大的。还有就是试试极性反相色谱柱和正相色谱柱，应该可以的

分不开就不要勉强了。不好分呗。 不过你想大家出主意也要介绍下大致结构。是天然产物吗？
给你介绍个我公司amquar的科研群，里面做植物化学的老人可能会给你帮助：1078982587 这是群主号。
十分感谢

单双键本身极性就比较接近。可考虑多试几根不同型号的柱子，流动相考虑极性大一些。
也考虑到了 但是不想色谱柱耐用性不好

不同填料的色谱柱可以试试。另外可以咨询一下色谱柱厂商，安捷伦、沃特斯等，听一下他们的建议。
先自己摸摸看吧  能自己摸索出来成就感蛮好

有用液相没，试试看，反应不完全，还是两种产物

你原来的色谱柱是哪家的呢？换个品牌的试试，有时出峰顺序都会改变很大的。还有就是试试极性反相色谱柱和正相色谱柱，应该可以的
终于成功了

一般等度走，实在不行就加酸是可以解决的啊！
努力尝试中

楼主不妨把这两个成分的大体性质说一下，做过的试验也可以简单写下，就这么两句话很难给出好的建议。

分不出来不要勉强。你要和合成人员沟通一下，让他们把反应优化好，确保氢化完全再送给你分。他们点TLC板判断不了反应完了没有，因为极性相差太小。你告诉他们可以用核磁监测，烯键的氢很容易辨别。你这样子分，纯度和量都很难保证，无法让合成人员满意。

分离度2.5就足够了!

分不出来不要勉强。你要和合成人员沟通一下，让他们把反应优化好，确保氢化完全再送给你分。他们点TLC板判断不了反应完了没有，因为极性相差太小。你告诉他们可以用核磁监测，烯键的氢很容易辨别。你这样子分，纯度 ...
分到2.5了找合成交差  再高分离度暂时没办法了

1.t选定一根柱子,更换缓冲盐类型、PH值等，如不行；更换色谱柱，由碳十八开始试，继而用碳八、氰基柱、氨基柱试；总之耐下心来，肯定是能试好的！
尝试了很多条件终于成功了

分不开就不要勉强了。不好分呗。 不过你想大家出主意也要介绍下大致结构。是天然产物吗？
给你介绍个我公司amquar的科研群，里面做植物化学的老人可能会给你帮助：1078982587 这是群主号。
不是天然产物 是合成的

A、B是什么类型的化合物，根据二者属性，选择色谱柱。摸方法时，最好用新柱子。

一般等度走，实在不行就加酸是可以解决的啊！

单双键本身极性就比较接近。可考虑多试几根不同型号的柱子，流动相考虑极性大一些。

楼主不妨把这两个成分的大体性质说一下，做过的试验也可以简单写下，就这么两句话很难给出好的建议。
先试了等度不行完全分不开。  主要是做有关物质条件摸索主峰后面一个已知杂质的峰一直和主峰分不开  最好的时候分离度也只有1.5

不同填料的色谱柱可以试试。另外可以咨询一下色谱柱厂商，安捷伦、沃特斯等，听一下他们的建议。