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大肠杆菌平板计数,涂板不长菌?

目前在做大肠杆菌平板计数实验,原菌液测Abs=0.8,可是稀释一系列梯度后,将溶液混匀取100uL涂板,37℃孵育后不见长菌,请问是什么原因呢?(用灭菌的0.9%氯化钠稀释)
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共12个回答
平板和摇瓶培养基成分是否一致?稀释液是不是不合适?(我都是用用磷酸缓冲液稀释的,效果很好)
一样的,你用的PBS吗?pH=7.4吗?用水可以吗?
平时也用0.9%氯化钠溶液稀释,没有什么问题,一考虑是不是选择的稀释倍数不合适,建议先从-1到-10(或其它)试试;二考虑是不是培养时间上不够,平时培养24+-1hr,可以增加到48hr试下。
目前试了10-1到10-8都没长菌,孵育2天也没有,稀释液换成灭菌水应该可以不会让细菌死掉吧?
目前试了10-1到10-8都没长菌,孵育2天也没有,稀释液换成灭菌水应该可以不会让细菌死掉吧?...
一般是不会的,你用原液再试试。
是不是稀释度太高了?一般用LB培养基就培养大肠杆菌,你用的什么培养基?大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型?
蛋白琼脂膏和肉汤,稀释度很低了,原菌液也没长菌,营养缺陷型,可以用灭菌水稀释吗?
原菌液也没长,可以先镜检看看菌的情况,有可能没菌,也有可能是污染了。
平板和摇瓶培养基成分是否一致?稀释液是不是不合适?(我都是用用磷酸缓冲液稀释的,效果很好)

是不是稀释度太高了?一般用LB培养基就培养大肠杆菌,你用的什么培养基?大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型?

一样的,你用的PBS吗?pH=7.4吗?用水可以吗?...
原液都不长,那肯定是你的菌种出了问题,跟稀释液稀释度没什么关系。你说了是营养缺陷型,肯定是菌培养出了问题,再重复一边,记录每个地方的操作,看结果找问题。

是不是稀释度太高了?一般用LB培养基就培养大肠杆菌,你用的什么培养基?大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型?
蛋白琼脂膏和肉汤,稀释度很低了,原菌液也没长菌,营养缺陷型,可以用灭菌水稀释吗?
目前试了10-1到10-8都没长菌,孵育2天也没有,稀释液换成灭菌水应该可以不会让细菌死掉吧?...
如果使用原液也没有生长的话,考虑下你的培养液中是不是菌体还是培养基中沉淀物。
平时也用0.9%氯化钠溶液稀释,没有什么问题,一考虑是不是选择的稀释倍数不合适,建议先从-1到-10(或其它)试试;二考虑是不是培养时间上不够,平时培养24+-1hr,可以增加到48hr试下。
蛋白琼脂膏和肉汤,稀释度很低了,原菌液也没长菌,营养缺陷型,可以用灭菌水稀释吗?...
既然是营养缺陷型的,那你用一般的培养基培养不出来,需要另外添加营养物质。

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