按照文献中的方法,以ABTS(7mmol, 10 equiv.)+K2S2O8(4.9mmol, 7 equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合,避光情况下储存12-16h,第二天以
乙醇稀释40-60倍,摇匀,静置5min,放入
比色皿中测734nm的吸光度(0.7左右),
测试吸光度随时间变化关系,时长为30min,发现吸光度有很明显的下降,30min大概降到0.45左右,换做水稀释时,吸光度下降更为严重,30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力,这种情况势必严重干扰结果,请问业内的专家们,出现这种问题的原因主要是什么?
(1)对ABTS、K2S2O8、乙醇和水等试剂的纯度有没有严格的要求?
(2)配置好的母液大概可以使用多久?
(3)还有哪些可能出问题的地方?
望不吝赐教,谢谢!!