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H2O2和TMB的显色反应,难道不是显蓝色嘛??

如题,求问在HRP催化下的H2O2和TMB的反应,反应后是什么颜色?
在文献中都看到催化产物为蓝色,但是我自己做的确实橘色的,请大神帮忙分析一下是哪里有问题。。

TMB为1mM的DMF溶液(乙醇溶液也试过),100uL;
H2O2是1mM的水溶液,100uL;
HRP(sigma货号P6782)活性为10u/mL,10uL,溶剂是pH7.4的PBS溶液。

按照上面顺序依次混合,发现加入HRP几乎瞬间就变成橘色了,刷新世界观。。
是生成了别的产物,还是其他什么问题?求解答。。

附实验图,上面一排是没有HRP的,下面一排是有HRP的
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共13个回答

是PH的问题,酸性条件下才是蓝色,4左右比较好,中性或碱性变黄

同问,变黄是什么原因,更离奇的是,通了不同的类酶,有的是蓝色的,有的是黄色

请问这个问题解决了吗,我也出现的这种情况

好神奇

你溶液ph是多少呢。酸性下反应产物是黄色的,还有颜色可能跟浓度有关系

我当时做实验的时候,也是刚开始是蓝色的,但是很快变成橘红色的了,终止反应会变成黄色的,我分析这个应该是与反应物的浓度有关系
之前做纳米材料仿酶是酸性条件下的蓝色,中性碱性好像没啥效果,酸性太强了(pH1)也不是蓝色,有些绿色发黄

这个颜色怎么做出来的。。帅呆啦

先不加HRP,做一个双氧水的浓度优化。
然后在轻微蓝色的情况下,做HRP的浓度递增。
我也是猜的,试试呢
是不是缓冲液中除辣根过氧化物以外有蛋白质?
有什么关系吗…
...
问问看的

你好 我也在做这个 有些问题可以交流吗?
哪个大学?
有什么关系吗…

哪个大学?

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