核酸酶的作用及应用领域是什么? ¹

核酸酶是一类能够催化核苷酸和核酸中的磷酸二酯键水解的酶。它们分为内切核酸酶和外切核酸酶，主要在DNA修复过程中起作用，修复紫外线引起的DNA光损伤和化学物与DNA形成的加合物。当N-糖基化酶无法完全修复异常的碱基形成AP位点时，AP内切核酸酶会在AP位点或其旁边的5'端切开DNA，形成5'-磷酸基和3'-OH基。此外，还有一些特异性的内切核酸酶，如切除由紫外线产生的嘧啶二聚体的UV内切核酸酶。这些核酸酶还具有外切作用，因此有时被称为"切除核酸酶"。核酸酶的作用对于蛋白质提取、样品处理、蛋白产量增加、溶液离心和色谱纯化等方面都有重要的应用。

核酸酶的应用领域

1）蛋白提取时去除核酸污染：在重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时，核酸酶可以有效降低样品粘度，方便后续操作。

2）与细胞或细菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量。

3）减少存放的外周血单细胞(PBMC)的结块现象。

4）降解核酸，有助于不可溶性蛋白复性前高质量包涵体的制备。

5）有效去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响，改善蛋白质的分离效果，增强2-DE分辨率。

6）在疫苗和病毒样品制备中去除DNA污染。

主要参考资料

[1] 卫生学大辞典