[western blot]电泳始终无法跑开上半部分的marker？

请教一下，我跑的是mTOR(分子量280左右)，用的是250分子量的marker，图示最上面的蓝色线是250kd，发亮的那条长长的白线是分离胶和浓缩胶的分界线，用的是7%的分离胶，开始100V恒压跑浓缩胶，后调150V恒压跑分离胶，从早上9点正式开始跑，一直到晚上9点，全程冰水混合物，但是上面三条线始终都跑不下来，也跑不开，下面的loading buffer早就跑下去了，我也试过将250那条线上面的分离胶拿出来转，后面完全没有目的条带，请问是哪方面出了问题呢？