如何制备3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯并应用于对硫磷免疫分析检测的抗原? ¹

背景及概述^[1-3]

3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯是一种有机中间体，可以通过酯化3-氯-4-羟基苯甲酸来合成。已有文献报道了3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯在对硫磷免疫分析检测的抗原制备中的应用。

制备^{[1] [3]}

报道一、

将3-氯-4-羟基-苯甲酸(1.0g,5.8mmol)溶解在甲醇(30mL)中，加入硫酸(3mL, 56.3mmol)，在60℃下搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，去除甲醇。将残余物分配到饱和的K₂CO₃溶液和乙酸乙酯(3×30mL)之间，干燥、过滤并浓缩，得到白色固体的3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(0.9g,83%)。ESI-MS m/z理论值：186.5，实测值：187.5(M+1)+；保留时间：1.17分钟(运行3分钟)。¹H NMR(400.0MHz,CDCl₃)δ 8.05(d,J=2.2Hz,1H),7.90-7.87(dd,J=8.8,2.2H,1H),7.06(d,J=8.8Hz,1H)和3.90(s, 3H)。

报道二、

将3-氯-4-羟基苯甲酸溶解在甲醇溶液（150mL）中（东京化学工业公司制造，7.31g），加入亚硫酰氯（15mL，和光纯药工业株式会社制造），在室温搅拌过夜。反应完成后，加入水，用乙酸乙酯萃取，并用水洗涤有机层。用硫酸镁干燥后，过滤除去固体，减压干燥滤液，得到残渣（7.47g）。

应用^[2]

CN202010014296.8公开了一种对硫磷半抗原、完全抗原的制备方法与应用。该方法中，将3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯溶解在乙腈中，加入无水碳酸钾和氯硫代磷酸二乙酯制得中间体：3-氯-4-((二乙氧基硫代硫代)氧基)苯甲酸甲酯，然后将中间体溶于四氢呋喃，加入盐酸制得化合物：3-氯-4-((二乙氧基硫代磷酰基)氧基)苯甲酸，即对硫磷半抗原。将半抗原与载体蛋白偶联，制备得到完全抗原。免疫动物实验表明，该人工抗原具有良好的免疫原性。该抗原可用于对硫磷免疫分析检测，具有广阔的应用前景。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201280018832.5 作为离子通道调节剂的吗啉-螺环哌啶酰胺

[2] CN202010014296.8一种对硫磷半抗原、完全抗原的制备方法与应用

[3] From PCT Int. Appl., 2009131090, 29 Oct 2009