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【求助】总黄酮测定时出现不溶物?

我按照2000年版一部P533所载方法:精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml,分别置25ml量瓶中,加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液 1ml,混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,500nm紫外分光度测定。
 所测定样品为中药60%酒精回流所得的浸膏粉,以及该浸膏粉上D101大孔树脂不同浓度酒精洗脱所得的浸膏粉。操作时,取浸膏粉适放入10mL常量瓶,以70%酒精溶解并定容,取1mL同上 述药典方法操作。当最后一步加入NaOH溶液时即出现很多细微的红色不溶悬浮物,放置15min后悬浮物不消失,以致不能 进行UV测定。我曾经怀疑是样品在70%的酒精溶解不完全引起的,我就把这步70%酒精定容后液体以微孔滤膜过滤后再取1mL滤液进行操作,但仍然出现悬浮物。
  所用试剂均为新鲜配制,芦丁对照品和空白均澄清,特向各位高手请教是什么原因引起的,谢谢!

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共9个回答
这几天测定样品里的总黄酮含量,用的是比色法,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色 体系,,无水乙醇为溶剂,加入亚硝酸钠时溶液出现白色乳状物,类似于沉淀,不知道是什么原因,各位虫子们,你们测黄酮时有没有出现这 ...
同出现了此问题,不知道有没有解决方案呢?
我采用高速离心方法,12000r/min,5min 然后问题来了,吸光度比之前下降了一半。所以,感觉行,求解决
我以前也出现过这个问题,后面发现是水得问题,是水得硬度过大,加入氢氧化钠产生氢氧化镁和氢氧化钙沉淀。
我也发现了相同的问题,是出现在95乙醇溶液中,显色后有絮状沉淀,其他浓度都很好。而且发现,95乙醇、无水乙醇配的空白对照也有浑浊。看来方法测定,适合浓度在70%以下的。
楼主最后可曾解决这个问题?
这几天测定样品里的总黄酮含量,用的是比色法,亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色 体系,,无水乙醇为溶剂,加入亚硝酸钠时溶液出现白色乳状物,类似于沉淀,不知道是什么原因,各位虫子们,你们测黄酮时有没有出现这种情况呢?
楼主最后可曾解决这个问题?
浓度过高,会出现红色不容物
我做测定的时候时常也出现了上述红色浑浊物,我虽然不知道如何去除这种影响,但是我有两条经验可以与您分享:
1.升高温度会加速红色不溶物的析出,反之即可。
2.最后一步+入NaOH后不必等15分钟测定,可适当提前测定,等到15分钟时再测定,观察二次数据变化规律。
我按照2000年版一部P533所载方法:精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml、6.0ml,分别置25ml量瓶中,加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液 1ml,混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟 ...
我做的最后也出现了不溶物,你最后找到解决的办法了吗
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