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如何制备藏花橙G并应用于蛋白质检测? 1

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背景及概述[1]

随着营养科学的发展,测定谷物、食品及饲料中的蛋白质、赖氨酸的含量需要一种准确、简易、快速、低消耗的分析方法来达到尽快的筛选出高蛋白、高赖氨酸的亲本材料。藏花橙G即6-羟基-5-(苯偶氮基)-2-萘磺酸,作为染色剂在着色法(简称DBC法)中的应用,不仅使作物蛋白质的分析和土壤中含氮元素与赖氨酸的测定工作变得简易、准确、快速,并成功地应用于麦类、玉米、高粱、小米、大豆和稻谷等作物蛋白质的分析,因而该化合物被引起了足够重视。随着测定蛋白质、赖氨酸的DBC法的标准化和推广应用,对染色剂藏花橙G的需求量日益增加,不仅要研制出不含有色杂质的高含量试剂,而且要提供一个能批量生产的合理 工艺,以满足国内市场需求。

如何应用藏花橙G?[2]

藏花橙G主要作为染色剂使用,其应用举例如下:制备一种蛋白质的检测试剂,该试剂以重量百分比,取0.1~10份的藏花橙G溶解在1~500份的磷酸缓冲溶液中,再加入1~500份的冰醋酸,最后用1~5000份的水稀释,振荡混合则得到所述的蛋白质的检测试剂。与传统方法相比它可以有效检测真蛋白质含量,能够在较宽的范围内进行蛋白质的检测,非蛋白质含氮化合物如尿素、三聚氰胺等基本不干扰检测的准确性。

如何制备藏花橙G?[1]

一种制备藏花橙G的方法如下:

1)磺化:在反应瓶中加入浓硫酸和β-萘酚,加热搅拌后降温,调节PH值,过滤析出的白色沉淀为粗品,进行重结晶得到β-萘酚-6-磺酸钠。

2)重氮化:将苯胺与水的溶液与浓盐酸混合生成苯胺盐酸盐,将亚硝酸钠溶液滴加到苯胺盐酸盐中,生成氯化重氮苯。

3)偶合:将磺化生成的β-萘酚-6-磺酸钠溶于碳酸钠溶液中,慢慢滴加氯化重氮苯,调节PH值,过滤得到染料粗品,进行重结晶后得到成品藏花橙G。

主要参考资料

[1] CN201110225287.4 藏花橙G的制备方法

[2] CN200910012461.X一种蛋白质的检测试剂、检测方法及检测仪

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