CRISPR/Cas9敲除？

多做几次，多挑选几个

描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小
感谢回复，您说的很对。但因为文献里写的有利用单靶点产生的缺失或插入有几十bp的，但给的图也有一两个产生几百到几千bp的，所以我们觉得有可能产生较长片段的敲除

描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小

利用CRISPR/Cas9敲除某20bp的序列，不仅没敲掉却造成这20bp序列中几个碱基发生突变，并造成之后的序列频繁发生点突变是什么情况，有人了解可以赐教吗？

描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小
对的，靶向一个基因设计2个sgRNA，也是为了增加knock out的概率。有试过单靶点，但是在线虫内利用co-CRISPR进行敲除，筛选得到的F1代编辑体数量太少。所以更多用双sgRNA敲除。