本文将讲述如何从植物中提取2,6-二甲氧基苯甲酸，旨在为相关领域的研究人员提供参考依据。
简述：2,6-二甲氧基苯甲酸是一种在植物来源的食物中发现的多酚化合物，常用作有机合成、医药中间体。
1. 从仙茅根茎提取
仙茅为石蒜科仙茅属植物仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的干燥根茎,味辛、性温,归肾、肝经。具有补肾壮阳、祛风除湿的作用。
（1）提取
取干燥的仙茅根茎6 kg粉碎,用40 L甲醇进行渗漉提取,提取液经55 ℃旋蒸浓缩至无醇味,加少量水混悬后,用正丁醇连续萃取3次,合并萃取液并减压干燥,得到仙茅正丁醇萃取物。
（2）分离纯化
采用1 kg硅胶进行湿法装柱(石油醚),正丁醇萃取物经甲醇溶解,加入0.5 kg硅胶混匀拌干后进行干法上样。分别用乙酸乙酯/石油醚(1/ 1)、乙酸乙酯以及乙酸乙酯/甲醇(100/1、50/1、20/1、10/1、5/1)梯度洗脱. 经HPLC检测合并相似流份,得到4个组分(Fr. A-D). Fr. A进一步经C18中压色谱柱,20%-40%甲醇梯度洗脱,得到含有化合物1、2、3、7四个成分含量较多的两个粗分段Fr. A-1和Fr. A-2;每个分段经过高压制备色谱,均以10%～20%乙腈水的梯度进行细分离,经过几次重复柱层析,得到上述4个单体. Fr. B经各种柱层析未能得到高纯度化合物. Fr. C经C18中压色谱柱,20%～40%甲醇梯度洗脱,得到Fr. C-1～3,其中Fr. C-3经高压色谱系统,15%～20%乙腈水洗脱,重复高压制备层析两次,得到纯度高的化合物4. Fr. C-2段经10%～15%乙腈水多次高压制备色谱系统层析,得到纯的化合物5、6. Fr. D经C18中压色谱柱, 20%～40%甲醇梯度洗脱,得到组分Fr. D-1、Fr. D-2. 其中Fr. D-1与Fr. C-1经5%乙腈水洗脱过后的残余浸膏合并,再经10%乙腈水多次高压制备色谱系统层析,得到化合物8、9、10。
其中，化合物1为2,6-二甲氧基苯甲酸：无色针晶. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 12.73 (s, 1H, COOH), 7.31 (t, J = 8.4 Hz, 1H, H-4), 6.68(d, J = 8.4 Hz, 2H, H-3, H-5), 3.75 (s, 6H, OMe-2, OMe-6); 13CNMR (101 MHz, DMSO) δ 167.19 (s, COOH), 156.57 (s, C-2, C-6), 130.90 (s, C-4), 114.78 (s, C-1), 104.58 (s, C-3,C-5), 56.21 (s, OMe-2, OMe-6)。
2.从川明参提取
川明参Chuanminshen violaceum Sheh et Shan. 为伞形科川明参属植物, 为我国特有单种属植物, 其干燥根作为常用中药材, 具有润肺化痰、和胃、生津、解毒等功效, 主治肺热咳嗽、热病伤阴, 为滋阴要药, 亦为四川道地药材, 川明参适用于病后补虚和强壮身体, 为一药食同源植物。
（1）川明参药材15 kg, 用5倍量95%乙醇回流提取1次, 4倍量95%乙醇回流提取2次, 每次3 h。提取完毕后, 减压浓缩提取液, 回收乙醇, 得浅黄色浸膏Ⅰ380 g。
（2）将浸膏用硅胶200 g拌样, 干燥后, 依次用石油醚, 醋酸乙酯回流提取, 经TLC初步检测, 显示此两部分主要化合物相同, 因此合并此两部分, 得浸膏Ⅱ150 g。将此浸膏通过反复硅胶柱层析, 石油醚/丙酮, 石油醚/醋酸乙酯梯度洗脱。从石油醚-丙酮 (30∶1) 和 (20∶1) 两部分流出物中均得到化合物A;石油醚-丙酮 (15∶1) 中得到化合物B, C, D;石油醚-丙酮 (8∶1) 流出物再经硅胶柱层析, 从石油醚-醋酸乙酯 (6∶1) 中得到E;石油醚-丙酮 (7∶1) 流出物经过反复硅胶柱层析, 从石油醚-醋酸乙酯 (5∶1) 中得到F, G;从石油醚-丙酮 (4∶1) 中得到H。
其中，化合物B为2,6-二甲氧基苯甲酸：白色粉末 (石油醚/醋酸乙酯) , m.p.187~190℃。1H-NMR (600 MHz, CDCI3) δ:12.19 (1H, s, COOH) , 6.68 (2H, d, J=8.3 4) , 7.31 (1H, t, J=8.34) , 3.75 (6H, s) 。
参考文献：
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