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本文将讲述如何用2，6-二甲氧基苯甲酸制备检测2，4，6-三硝基苯酚的小分子荧光探针，旨在为相关领域的研究人员提供新的思路和实验支持。
背景：2，6-二甲氧基苯甲酸，英文名为2,6-Dimethoxybenzoic acid，分子式为C9H10O4，外观与性状为白色固体，熔点：186～187℃，难溶于水，溶于碱及有机溶剂，常用作有机合成、医药中间体，是制备系列酰基膦氧化合物的中间体。
应用：制备检测2，4，6-三硝基苯酚的小分子荧光探针。
2,4,6-三硝基苯酚(TNP)，通常称为苦味酸(PA)，是一种常见的爆炸物，具有剧毒性。它在水中具有良好的溶解性，暴露的TNP很容易污染土壤和地下水，且在生物系统和环境中难以降解，对水生生物造成严重危害。根据《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)规定，集中式生活饮用水地表水源地中TNP的质量浓度不得超过0.5 mg/L。因此，对TNP的检测变得愈发重要。
以2，6-二甲氧基苯甲酸为起始原料得到氨基噻二唑衍生物，通过Gattermann反应合成一种杂环芳族卤化物2-氯-5-(3-氯-2，6-二甲氧基苯基)-1，3，4-噻二唑(L)，可将其用作小分子荧光探针检测2，4，6-三硝基苯酚(TNP)，研究结果表明，探针L对TNP具有高选择性、高灵敏度、抗干扰能力强，在较宽的pH值范围内，仍然表现出良好的荧光性能。具有较低的检测限 (4.2×10－ 7 mol/L)，可用于实际水样中TNP的检测。实验步骤如下：
（1）2-氨基-5-(2，6-二甲氧基苯基)-1，3，4-噻二唑(1)的合成
取2，6-二甲氧基苯甲酸(5.46 g，30 mmol)、硫代氨基脲(2.73 g，30 mmol)和 40 mL二氧六环于圆底烧瓶中，室温搅拌溶解，在0～5℃冰水浴条件下搅拌，同时向上述溶液中逐滴加入7 mL POCl3，加热回流0.5 h，冷却至室温，缓慢加入20 mL水，再回流4 h。将反应液趁热倒入装有碎冰的烧杯中，用浓氨水调节pH值至8～9，抽滤，干燥，用乙酸乙酯热溶，趁热过滤得乳白色固体2.85 g。产率:40.1%，mp 236～238℃。
（2）2-氯-5-(3-氯-2，6-二甲氧基苯基)-1，3，4-噻二唑(L)的合成
向圆底烧瓶中加入化合物1(1.42 g，6 mmol)，新制备的铜粉(0.38 g，6 mmol)和浓盐酸(25 mL)。在0～5℃的条件下，搅拌15 min，然后将在冰水浴中冷却的NaNO2(2.06 g，30 mmol)溶液逐滴加到上述溶液中。混合物在0～5℃下搅拌1.5 h后，加热至70℃。5 h后停止反应，将混合物过滤。所得粗产 品用硅胶柱分离［V(乙酸乙酯)∶V(石油醚)=1∶15］，得白色固体0.87 g。产率50.1%，mp 120～ 122℃;
（3）荧光光谱测量方法
在二甲基亚砜(DMSO)中配制1 mmol/L的探针L储备液和10 mmol/L的TNP储备液。一系列的硝基芳族化合物(NACs)，2，4-DNT、1，4-DNB、4-NBA、1，3-DNB、1，2-DNB、2-NP、NB、Phe和m-Thb储备液的浓度为10 mmol/L。测试荧光光谱时，用移液枪移取30μL的探针L储备液，加入含有3 mL DMSO-H2O溶液体系［V(DMSO)∶V(H 2 O)=2∶1］的荧光比色皿中，分别加入各种小分子等检测液，混合均匀，测定探针的荧光光谱。用UV-Vis测出探针L的最大吸收波长为280 nm。狭缝宽度为 5 nm/5 nm。
参考文献：
[1]董子越,周晓霞,赵晓慧等. 一种可用于检测2,4,6-三硝基苯酚的杂环芳族卤化物小分子荧光探针 [J]. 应用化学, 2020, 37 (03): 332-339.
