荧光素酶是一种用于双荧光素酶报告基因实验系统的重要组成部分。通过与特定底物反应产生生物荧光，然后使用化学发光仪测定释放的生物荧光，从而比较不同组间基因表达的差异。
下面解答一些常见问题：
1.为什么在体外细胞培养中需要经常进行抗生素筛选？
在体外细胞培养中，抗生素筛选可以确保细胞的纯度和稳定性，尤其在接种代数较多的情况下。
2.底物荧光素是如何进入小鼠体内的？需要多少？
荧光素可以通过腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内，常用浓度为150mg/kg。
3.荧光素酶的发光特性如何？
荧光素酶注射后约一分钟开始发光，强度通常在十分钟后达到最高点，持续约20-30分钟后开始衰减，约三小时后完全消失。
4.如何保证荧光素酶的稳定性？
荧光素酶基因插入细胞染色体后，随着细胞的分裂、转移和分化，荧光酶会持续稳定地表达。
5.标记的肿瘤接种后会发生荧光素酶的丢失吗？
荧光素酶基因的标记非常稳定，丢失的可能性非常小，不会影响实验结果。
6.可以用肿瘤块而不是细胞进行接种吗？
可以先用标记的细胞在皮下接种，然后从皮下取出肿瘤块进行原位接种。
7.标记细胞与标记基因所用的启动子有何不同？
标记细胞一般使用能稳定表达的启动子，用于显示细胞数目。标记基因一般使用此基因的启动子，与此基因平行表达，用于显示此基因的表达数目。
8.荧光素酶的表达高低与所用启动子的活性有关吗？
荧光素酶的表达与所用启动子的活性相关，启动子活性高则荧光素酶表达高，反之则表达低。
9.常用的荧光素酶有哪些特性？
常用的荧光素酶包括Luciferase和Renilla荧光素酶，二者的底物和发光特性不同，适用于不同的实验需求。
10.组织切片可以观察到生物发光吗？
组织切片可以观察到生物发光，但荧光酶的体外活性保持时间较短，约几十分钟。
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