蛋白酶是一类能够水解蛋白质内的肽键的酶。它们广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶主要由霉菌、细菌、酵母和放线菌产生。
根据水解多肽的方式，蛋白酶可以分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断，形成较小的肽段。外肽酶从蛋白质分子的末端逐个水解肽键，释放氨基酸。根据活性中心和最适pH值的不同，蛋白酶又可分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶。根据最适pH值的不同，蛋白酶分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。工业上常用的蛋白酶主要是内肽酶。
蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。微生物蛋白酶主要由霉菌、细菌、酵母和放线菌产生。
蛋白酶是一类催化蛋白质水解的酶。常见的蛋白酶包括胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。蛋白酶对底物有严格的选择性，只能作用于特定的肽键。蛋白酶广泛分布于人和动物的消化道中，也在植物和微生物中丰富存在。由于动植物资源有限，工业上常利用枯草杆菌、栖土曲霉等微生物进行蛋白酶的生产。
胰蛋白酶能够水解细胞间的蛋白质，使细胞分散。不同组织或细胞对胰酶的作用反应不同。胰酶的活性受浓度、温度和作用时间的影响，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶的作用能力最强。使用胰酶时，需要控制好浓度、温度和时间，以免过度消化导致细胞损伤。胰酶的活性受Ca2+、Mg2+、血清和蛋白质的影响，因此在配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的溶液。终止消化时，可使用含有血清培养液或胰酶抑制剂来停止胰酶对细胞的作用。
制备胰蛋白酶的方法：
1. 称取胰蛋白酶粉剂，溶解于双蒸水或PBS(D-hanks)液中，搅拌混匀，置于4℃过夜。
2. 使用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)对配好的胰酶溶液进行消毒过滤。然后将溶液分装到小瓶中，保存在-20℃。
胰蛋白酶能够催化特定肽键的水解，这个催化过程不需要能量，不会使酶失去活性，也不会改变酶的形状或导致自身水解。底物与酶的活性中心结合是可逆的，这种结合使得蛋白质的特定肽键变形并被活化，更容易受到水分子的攻击，从而断裂形成小分子多肽或氨基酸。不同的蛋白酶作用于不同的肽键，因此胰蛋白酶并不能作用于所有肽键。
1
