兔乙酰胆碱受体抗体(ACHRAB)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法（ELISA）检测样本中乙酰胆碱受体抗体(ACHRAB)的含量。
检测原理：将兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)捕获抗体包被在微孔中，然后依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体。经过温育和洗涤后，使用底物TMB进行显色。颜色的深浅与样品中的兔乙酰胆碱受体抗体(AChRab)呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），并计算样品浓度。
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
3. 样本孔中加入待测样本50μL，空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
重症肌无力（MG）是一种自身免疫性疾病，对神经肌接头处的乙酰胆碱受体（nAChR）产生免疫反应。抗nAChR抗体激活的补体攻击反应可以导致nAChR甚至突触后膜的破坏，从而引起神经肌肉传导功能障碍。
本研究尝试了两种方法表达nAChR，以获得稳定且具有生物学活性的蛋白。
方法一是使用CHO细胞表达人乙酰胆碱受体α亚单位胞外域。通过PCR法扩增nAChRα1亚基ECD1-216，将其装入pcDNA3.1表达载体中，然后转染入CHO细胞。在转染后的不同时间点进行荧光实时定量PCR和125I标记的银环蛇毒素测定，以评估ECD基因的表达水平和细胞培养上清中ECD蛋白的表达。
方法二是使用大肠杆菌表达含有三个突变碱基的大鼠乙酰胆碱受体α亚单位胞外域。将大鼠AChRα1亚基胞外域蛋白中的三个氨基酸进行突变，并在Bl-21菌株中大量表达。通过溶液稀释法对表达正确的蛋白进行复性。
通过这些方法，可以替代来源短缺的天然nAChR，同时建立快捷、简便的抗nAChR抗体检测方法，提高临床MG的诊断效率。
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