检测喹喔啉-2-羧酸是化学分析中的重要课题。本文旨在探讨一些有效的方法来检测喹喔啉-2-羧酸，以满足其在相关领域中的应用需求。
背景：卡巴氧(carbadox，CDX)是喹喔啉-1,4-二氧化物的取代衍生物之一，是最早合成的一种抗菌药物。其作用机理是抑制细菌脱氧核糖核酸(DNA)的合成，具有广谱的抗菌作用，常用于预防和治疗猪痢疾和仔猪肠炎，也常用作生长促进剂。但由于卡巴氧具有较强的致突变和致癌作用，许多国家都已经禁止了该药物的使用。鉴于卡巴氧的毒性和潜在危害，有必要对其药物残留进行检测。喹喔啉-2-羧酸(quinoxaline-2-carboxylic acid, QCA)被美国、英国等国法定为卡巴氧的标示残留物。
检测：
1. 张泽英等人以喹喔啉-2-羧酸及其与γ-氨基丁酸(ABA)的衍生物(QCA-ABA)为半抗原,将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工抗原。以QCA-BSA和QCA-ABA-BSA为免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体,利用紫外分光光度计分析结合物的结合情况,间接ELISA和间接竞争ELISA分析抗体特性。结果表明,以QCA-BSA、QCA-ABA-BSA为免疫原制备的抗体平均效价分别为12.8×104、6.4×104。2种抗体对QCA灵敏度低,IC50均大于10000ng/mL,而对QCA-ABA的灵敏度高,IC50分别为14.2和7.75ng/mL,特异性好,仅与3-甲基-喹喔啉-2-羧酸(12%)、卡巴氧(0.038%)和喹赛多(0.028%)有较低程度的交叉反应,与衍生试剂和结构类似物均无交叉反应(<0.01%)。该抗体为建立动物可食性组织中QCA残留物的快速检测方法奠定了基础。
2. 肖甄磊等人采用碳二亚胺法将卡巴氧代谢物喹喔啉-2-羧酸(QCA)与牛血清白蛋白(BSA)偶联，采用用混合酸酐法将其与卵清白蛋白(OVA)偶联，分别将其作为免疫原(QCA-BSA)和包被原(QCA-OVA)进行抗血清的制备及ELISA 实验。采用碳二亚胺法合成免疫原(QCA-BSA)，其主要偶联剂是EDC 和NH S；采用混合酸酐法合成包被原(QCA-OVA)，其主要偶联剂是三正丁胺和氯甲酸异丁酯。经过多次动物免疫及EILSA实验，结果表明，获得了高效价的特异性抗体。
3. 邱银生等人为了监测猪食用组织中卡巴氧 (carbadox)的残留 ,建立了检测猪肝脏、肾脏、肌肉等组织中卡巴氧的标示残留物喹喔啉 - 2 -羧酸 (Quinoxaline- 2 - carboxylic acid,QCA)的高效液相色谱法。组织样品经碱水解 ,液 -液分配提取 ,用离子交换色谱柱净化 ,洗脱液作浓缩后用甲醇溶解进行测定。色谱柱为 ODS C18柱 ;流动相为甲醇 -水 (体积比 4 0∶ 6 0 ) ,每 1L中加入 8mL冰乙酸 ,流速为 1.0 mL / min;定量分析用紫外检测器 ,波长 32 0 nm,确证性分析用二极管阵列检测器 ,波长 2 5 0～ 5 0 0 nm。喹喔啉 -2-羧酸工作液质量浓度在 0.0 3～ 0.96 mg/ L 范围内 ,药物峰面积与浓度呈良好的线性关系 ,相关系数 r=0.9999。组织中添加药物的质量分数为 0.0 15、0.03、0.06μg/ g时 ,肝脏样品回收率分别为 (73.55±9.46) %、(80.33±14.95 ) %、(75.84±7.42 ) % ;肾脏样品分别为 (70.89±1 0.33) %、(74.89±7.19) %、(83.33±10.68) % ;肌肉样品分别为 (69.4 9± 7.26 ) %、(66.44± 5.09) %、(62.1 1± 6.08) %。该方法条件下 ,3种组织中药物最低检出质量分数均为 0.015 μg/ g,回收率测定的日内及日间相对偏差 (RSD)分别 <18%和 <20 %。
参考文献：
[1]张泽英,袁宗辉. 喹喔啉-2-羧酸人工抗原合成与抗体制备 [J]. 中国畜牧兽医, 2013, 40 (10): 152-155.
[2]肖甄磊,谢忠良,何计国. 卡巴氧的代谢物喹喔啉-2-羧酸人工抗原的合成及其多克隆抗体的制备 [J]. 食品科学, 2008, (05): 60-64.
[3]彭艳,刘煜. 气质联用法分析动物肌肉、肝脏和肾脏中喹喔啉—2羧酸的含量(英文) [J]. 食品科学, 2006, (02): 223-226.
[4]邱银生,袁宗辉,殷居易. 猪食用组织中喹喔啉-2-羧酸的高效液相色谱检测方法 [J]. 中国兽医学报, 2003, (03): 286-288. DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2003.03.031
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