我的有效硼测定,标准曲线的最大浓度的吸光度才达到0.3,不知道自己的方法是否有问题。2.主要试剂
(1) 95%酒精(二级);
(2)
无水酒精(二级);
(3) 姜黄素—草酸溶液:称取0.04g姜黄素和5g草酸,溶于无水酒精(二级)中,加入4.2ml6mol/LHCl,移入100ml石英容量瓶中,用酒精定容。贮存在阴凉的地方。姜黄素容易分解,最好当天配制。如放在冰箱中,有效期可延长至3—4天。
(4) B标准系列溶液:称取0.5716gH3BO3(一级)溶于水,在石英容量瓶中定容成1升。此为100mg/LB标准溶液,再稀释10倍成为10mg/LB标准贮备溶液。吸取10mg/LB溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL,用水定容至50mL,成为0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mg/LB的标准系列溶液,贮存在塑料试剂瓶中。
(5) 1 mol/L CaCl2溶液:称取7.4 g CaCl2?2H2O (二级)溶于100mL水中。
3.主要仪器
分光光度计,石英三角瓶250ml,石英容量瓶,石英回流转置,离心机,
恒温水槽,磁蒸发皿。
4.操作步骤(姜黄素比色法)
(1)待测液制备:称取风干土壤(通过1mm尼龙筛)10.00g 于250 mL或300 mL的石英三角瓶(或塑料瓶)中,加20.0 mL(水土比1:2)无硼水(沸水),盖表面皿,置于沸水浴中浸提5 min,取下冷水冷却,加入4滴0.5 mol/L CaCl2溶液,用塑料漏斗干过滤,滤液承接于10 mL塑料比色管中。
(2)测定:吸取1.00mL清液,放入瓷蒸发皿中,加入4 mL姜黄素溶液。在55±3℃的水浴上蒸发至干,并且继续在水浴上烘干15分钟除去残存的水分。在蒸发与烘干过程中显出红色,加20.0 mL95%酒精溶解,用干滤纸过滤到1cm光径比色槽中,在550nm波长处比色,用酒精调节比色计的零点。假若吸收值过大,说明B浓度过高,应加95%酒精稀释或改用580或600nm的波长比色。
(3)工作曲线的绘制:分别吸取0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mg/LB标准系列溶液各1ml放入瓷蒸发皿中,加4 mL姜黄素溶液,按上述步骤显色和比色。以B标准系列的浓度mg/L对应吸收值绘制工作曲线。