色谱峰反转？

资料上说的是百分之0.2%的磷酸，并没有说明调至PH为多少。0.2%的磷酸是不是酸性太强了，PH值才一点多，很多色谱柱无法承受吧...
色谱柱要用耐酸性的。
峰1、峰2做对照了吗？不能用峰大、峰小来判断。
也许你的化合物在容积中不稳定，或者是不同批次的。
好多东西不清楚，没法有更多的联想。

看看是不是因为色谱柱接反了呢？
没有啊，而且色谱柱接反了应该不会改变柱子的极性吧

看看是不是流动相与样品发生了某种反应

色谱柱接反了不会影响出峰的顺序。
以前做过一个品种，是门冬氨酸鸟氨酸，流动相的pH变化会影响到出峰的顺序。你的流动相调pH值了吗？如果调了可能会出现这种情况。
希望有所帮助。

首先确定变小的色谱峰确实是峰1，
出现差异的两次实验其色谱条件完全一样吗？我指的是所有条件，加入流动相另新制的也不算完全一样的那种。
有时候有些物质的分离对流动相中的各组分的比例有严格的要求，多一点或者少一点可能就会出现顺序颠倒，

色谱柱接反了不会影响出峰的顺序。
以前做过一个品种，是门冬氨酸鸟氨酸，流动相的pH变化会影响到出峰的顺序。你的流动相调pH值了吗？如果调了可能会出现这种情况。
希望有所帮助。
资料上说的是百分之0.2%的磷酸，并没有说明调至PH为多少。0.2%的磷酸是不是酸性太强了，PH值才一点多，很多色谱柱无法承受吧

流动比例是否有问题，建议重新配置流动相