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雌二醇核酸适配体的应用有哪些? 1

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雌二醇核酸适配体的应用正在不断拓展,并为科学界带来了许多新的研究机遇。


背景:雌二醇(E2)是环境内分泌干扰物,其滥用及残留严重威胁着人类健康。20世纪80年代初,许多国家和组织就已经通过立法来限制或禁止在动物源性食品中使用甾类同化激素。目前,雌二醇传统检测方法主要包括仪器分析法和免疫分析法。仪器分析法虽然准确度好、灵敏度高,但存在操作复杂、耗时长、检测成本高等缺点;免疫分析法耗时长、检测成本高,易出现假阳性,不适合大批量样品检测。由于国内外相关机构和组织对食品和环境中雌二醇的限量要求十分严格,而常规检测方法易受到样品复杂基质的干扰,因此开发简单、灵敏和高选择性的雌二醇检测技术十分必要。

核酸适配体作为一种“化学抗体”,具有亲和力高、特异性强、易于合成、修饰方便、成本低、稳定性好等优点,在雌二醇检测领域具有广泛的应用前景。


雌二醇核酸适配体的应用:随着核酸适配体筛选种类的增加和表征方式的多样化,基于核酸适配体检测雌二醇的方法日趋广泛,主要包括纳米金比色法、荧光光谱法、表面增强拉曼光谱法、电化学法等。


1. 纳米金比色法

纳米金比色法具有操作简单,可现场快速检测等优点,是核酸适配体应用于雌二醇检测的常用方法。金纳米颗粒在水溶液体系中常以溶胶的形式存在,具有独特的光学性能以及物理性能。当金纳米颗粒尺寸、形状和存在状态变化时,其表面等离子共振性质发生改变,导致其颜色发生明显变化。雌二 醇核酸适配体可通过静电作用吸附于金纳米颗粒表面,使金纳米颗粒在高盐环境中呈现红色;加入靶标后,核酸适配体与靶标特异性结合,金纳米颗粒因失去核酸适配体的保护而发生团聚,变成蓝色。


2. 荧光光谱法

以荧光基团标记的核酸适配体为识别元件(或在核酸适配体的互补链上修饰荧光基团),以常用的猝灭基团或者新型纳米材料作为荧光猝灭剂,当靶标与核酸适配体发生特异性识别后,由于荧光共振能量转移导致荧光信号发生变化。当前应用于核酸适配体的荧光探针主要包括羧基荧光素和量子点等,荧光猝灭剂主要包括羧基四甲基罗丹明、钌配合物、石墨纳米颗粒、黑磷纳米片、二硫化钼纳米片等。荧光光谱法因具有操作简单、灵敏度高、抗干扰能力强等 优点而得到广泛应用。


3. 表面增强拉曼光谱法

表面增强拉曼光谱是一种利用金属等离子材料 显著增强拉曼信号的指纹光谱。基于核酸适配体的表面增强拉曼光谱法具有无损、高灵敏度、高特异性、在线实时检测以及高通量性能等优点,可被用于雌二醇的检测。YAO等采用表面增强拉曼光谱法和链式杂交反应(HCR),建立了基于金-银 核壳纳米颗粒和雌二醇核酸适配体的表面增强拉曼光谱检测方法。


4. 电化学法

将核酸适配体固定在电极表面,电极插入待测溶液后,电极上的核酸适配体与靶标结合,改变了电极的电化学信号,通过测定电极的电位、电势、电流 等的变化来确定待测物的浓度。LIU等开 发了电化学发光传感器,引入核酸适配体稳定的银纳米簇作为猝灭探针,通过电化学发光信号实现对雌二醇的定量检测,该方法具有较高的灵敏度(检出限为0.003ng·L-1)、稳定性(测定值的RSD1.1%~2.5%)和选择性,为建立小分子检测技术提供了新的途径。贺彩梅等利用巯基自组装技术将核酸适配体探针固定在二硫化钼/纳米金修饰的玻碳电极表面,与末端带巯基的部分互补DNA链杂交,将硫堇/纳米金电化学指示剂自组装在杂交后的双链DNA上,制备了雌二醇电化学适配体传感器,可用于自来水中雌二醇含量的测定。


参考文献:

[1]左海根,黄芷诺,李毛英等.核酸适配体在雌二醇分析中的研究进展[J].理化检验-化学分册,2023,59(07):862-868.

[2]朴云仙,胡慧,姚兰等.利用核酸适配体修饰氧化石墨烯复合物的17β-雌二醇检测机理[J].吉林大学学报(地球科学版),2020,50(04):1189-1196.DOI:10.13278/j.cnki.jjuese.20190052.

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