人牛血清白蛋白(BSA)ELISA试剂盒里面有什么?

  人牛血清白蛋白(BSA)ELISA试剂盒里面有什么?

  人牛血清白蛋白(BSA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

  本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中牛血清白蛋白(BSA)的含量。

  实验原理：

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人牛血清白蛋白(BSA)水平。用纯化的人牛血清白蛋白(BSA)捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人牛血清白蛋白(BSA)，再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人牛血清白蛋白(BSA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中人牛血清白蛋白(BSA)含量。

  试剂盒组成：

  试剂盒组成48孔配置96孔配置保存

  说明书1份1份

  封板膜2片2片

  密封袋1个1个

  酶标包被板1×481×962-8℃保存

  标准品0.3ml×6管0.3ml×6管2-8℃保存

  酶标试剂5 ml×1瓶10 ml×1瓶2-8℃保存

  样品稀释液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

  显色剂A液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

  显色剂B液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

  终止液3 ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存

  20×浓缩洗涤液15ml×1瓶25ml×1瓶2-8℃保存

  注：标准品浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0 ng/mL.

  操作步骤

  标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。

  加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

  加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

  温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

  配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

  显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

  终止：每孔加终止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

  测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

  检测范围：

  0.25 ng/mL - 8 ng/mL

  灵敏度：

  低检测浓度小于0.1 ng/mL

  保存条件及有效期：

  1.试剂盒保存： 2-8℃。

  2.有效期： 6个月

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