生物医学工程

烟草叶片瞬时表达蛋白？

大家好，我想做一个实验，通过异源表达的方式，将某个蛋白基因导入到农杆菌里面，然后通过在烟草叶片瞬时表达获得较多的需要的蛋白，由于我这种germin like protein蛋白很可能具有SOD酶的活性，但是由于这种蛋白非常需要糖基化，我曾经克隆到大肠杆菌，发现没有活性表现出来，所以只能采取在烟草叶片进行试验，实验室没有人做过，不知道有哪个高人做过类似的试验，如果您有我需要的载体和方法，只要能完成试验，购买也可以
   同时我写上三篇文献关于这个实验的载体，发现他们用到的不同的载体，有的是烟草叶片，有的是烟草BY-2，不知道哪种容易一些，具体步骤只要有一个有人能告诉我就行，麻烦大神了
第一篇：载体：pBIN61  材料：本生烟草《A germin-like protein with superoxide dismutase activity in pea nodules with high protein sequence identity to a putative rhicadhesin receptor》
第二篇：载体：1号：pGWB5  2号：pGWB414  农杆菌菌株：GV3101::pMP90RK  《Members of the germin-like protein family in Brassica napus are candidates for the initiation of an oxidative burst that impedes pathogenesis of Sclerotinia sclerotiorum》
第三篇：载体：pIG121-Hm  材料： (Nicotiana tabacum L. cell line Bright Yellow-2 [BY-2])  《Molecular characterization of atmospheric NO2-responsive germin-like proteins in azalea leaves》
大神一定帮帮忙啊，小弟感激不尽

展开

0评论 +关注

共6个回答

顾凉.，设备工程师 2019-01-02回答

请问楼主有载体pIG121-Hm的序列吗？

1 评论 0 举报

青灯古酒白衣，设备维修 2019-01-02回答

Nicotiana tabacum烟草叶片，GV3101，我们自己的载体，之前为了收集一些通道蛋白，我们做过类似的事

19 评论 0 举报

清欢作伴。，化工研发 2019-01-02回答

你好，克隆到e.coli 通过native page 并没法得到SOD酶活，所以我想做烟草试试，我先强调一下我的这个germin like protein 有没有我需要的sod酶活也是未知的，所以只要做了才知道。我把序列发给您，麻烦了。氨基酸序 ...
已经发消息给你喽，注意接收

展开

14 评论 0 举报

良药，结构工程师 2019-01-02回答

我想问一下,您克隆到大肠杆菌中表达，表达的结果是什么（可帮您分析下原因）
或者您把序列发给看一下，或许能帮到你

6 评论 0 举报

庆生，化工研发 2019-01-02回答

我想问一下,您克隆到大肠杆菌中表达，表达的结果是什么（可帮您分析下原因）
或者您把序列发给看一下，或许能帮到你
你好，克隆到e.coli 通过native page 并没法得到SOD酶活，所以我想做烟草试试，我先强调一下我的这个germin like protein 有没有我需要的sod酶活也是未知的，所以只要做了才知道。我把序列发给您，麻烦了。氨基酸序列MASPSSFCLLAVLLALVSWQAIASDPSPLQDFCVADKHSPVLVNGFACLDPKYVNADHFFKAAMLDTPRKTNKVGSNVTLINVMQIPGLNTLGISIARIDYAPLGENPPHTHPRATEILTVLEGTLYVGFVTSNPNNTLFSKVLNKGDVFVFPEGLIHFQFNPNPHQPAVALAALSSQNPGAITIANAVFGSKPPISDDILAKAFQVEKGTIDWLQAQFWENNHY
cds区cdna序列ATGGCTTCACCATCTTCCTTCTGCCTCCTCGCTGTTCTTCTTGCGTTGGTCTCGTGGCAGGCCATCGCTTCTGATCCTAGCCCTCTGCAGGACTTCTGCGTTGCCGATAAGCACTCACCTGTGCTTGTTAATGGATTTGCTTGCCTGGACCCAAAGTACGTGAATGCAGACCACTTCTTCAAGGCAGCCATGCTCGACACTCCTAGAAAAACAAACAAGGTTGGATCAAATGTCACACTGATCAACGTCATGCAGATCCCTGGACTTAATACACTCGGCATCTCAATTGCACGCATCGACTACGCACCCTTGGGTGAGAACCCACCGCACACACACCCCCGTGCAACTGAGATCCTCACAGTCCTTGAGGGAACCCTCTATGTCGGCTTTGTCACATCTAATCCAAACAACACACTATTCTCCAAGGTGCTCAACAAGGGTGATGTGTTTGTTTTCCCTGAGGGGCTCATCCACTTCCAATTCAACCCTAACCCCCATCAGCCTGCGGTTGCACTTGCTGCACTTAGCAGCCAAAACCCTGGGGCTATTACCATTGCAAATGCAGTGTTCGGATCAAAGCCACCGATCTCAGATGATATTTTGGCAAAGGCATTCCAGGTTGAGAAGGGCACCATTGATTGGCTCCAGGCTCAGTTTTGGGAGAACAACCACTACTAA

展开

2 评论 0 举报

最囍.，工艺工程师 2019-01-02回答

Nicotiana tabacum烟草叶片，GV3101，我们自己的载体，之前为了收集一些通道蛋白，我们做过类似的事
你好啊，您有没有qq电话之类，可以跟您多联系一下，不会打扰太多时间，如果能帮到忙，我也愿意付一些费用

展开

6 评论 0 举报