引言：
吲哚乙酸酯是一类具有重要化学结构的化合物，常见于有机合成和化学分析领域。其独特的分子结构赋予了其特定的化学和生物活性特性。
简介：吲哚乙酸酯，英文名称：INDOXYL ACETATE，CAS：608-08-2，分子式：C10H9NO2，外观与性状：白色至灰白色结晶粉末，密度：1.255 g/cm3，折射率：1.633。吲哚乙酸酯是吲哚的衍生物，吲哚是一种在许多天然物质中发现的双环芳香族有机化合物。吲哚作为一种重要的生物活性中间体，在有机合成中常作为有效的有机中间体或者原料，用于医药，染料等领域。吲哚乙酸酯不是天然的，但常被合成用于各种科学研究。
1. 结构分析
吲哚乙酸酯具有由两个基本功能组组成的独特结构：
（1）吲哚环：该双环芳香系统构成分子的核心，由苯环与含氮原子的吡咯环融合而成。吲哚环的存在赋予吲哚乙酸酯芳香特性
（2）乙酸酯基：乙酰基 (CH3CO-) 通过酯键 (C-O-C) 连接到吲哚环的第三位 (C3)。酯键为酯酶水解引入了潜在的位点。
2. 合成：
将3-碘-lH-吲哚（23 g，94.65 mmol）的乙酸（300 mL）溶液放入500 mL圆底烧瓶中。将 CH3COOAg (31.6 g, 189.22 mmol) 加入烧瓶中。将反应混合物在油浴中在 90°C 下搅拌 1 小时。通过 TLC (乙酸乙酯/石油醚 = 1:1) 监测反应进程。过滤后，使用旋转蒸发器在真空下浓缩滤液。将所得溶液溶解在 100 mL 乙酸乙酯中，并用 100 mL NaCl(aq.) 洗涤两次。通过从 MeOH/H2O (2:3) 中重结晶纯化粗产品，得到 8.5 g (41%)吲哚乙酸酯，为深紫色固体。
3. 应用：
吲哚乙酸酯可作为生化试剂。它用作区分各种微生物中酯酶（切割酯键的酶）的底物。这一特性使研究人员能够在不同的生物样品中鉴定和表征这些酶。举例如下：
脂肪酶在微生物、真菌、植物和动物的代谢中起着至关重要的作用，在分析化学中，它们通常用于检测脂肪和甘油三酯。脂肪酶活性的测定在毒理学中也很重要，当脂肪酶活性可以通过有机磷酸盐和其他杀虫剂增加和降低时，以及在诊断心脏病的医学中也是如此。测定脂肪酶活性的标准方法基于在含有吐温的脂肪酶缓冲液中裂解酯键。
众所周知，乙酰胆碱酯酶与脂肪酶属于同一组水解酶，并且它裂解乙酸吲哚酯，因此Tomas Valek等人假设乙酸吲哚酯可以报告与脂肪酶的类似反应。方法基于吲哚基乙酸酯作为脂肪酶的底物，其中吲哚醇乙酸酯被脂肪酶裂解成吲哚基和乙酸酯部分，并产生蓝色靛蓝。为了证明吲哚乙酸酯是脂肪酶活性检测的底物，在吲哚乙酸酯0–50 mmol/l（0、6.25、12.5、25 和 50 mmol/l）的浓度范围内进行测定。溶液总体积为200 μl，以40 μl的量加入IA，以5 μl或10 μl（100和200 U）两种不同量的脂肪酶加入，残留体积由磷酸盐缓冲液完成。使用波长 620 nm 在 0 至 30 分钟的时间范围内测量溶液的吸光度。基于脂肪酶裂解吲哚乙酸酯的反应原理如图所示:
该方法针对不同的时间和酶量进行了优化，并与标准吐温测定法进行了比较。在反应时间20分钟内用10 μl脂肪酶测量的校准曲线显示出最佳的分析参数，并且显示Michaelis-Menten响应，Michaelis-Menten常数等于8.72 mmol/l。基于吲哚醇乙酸酯的方法比脂肪酶活性测定的标准方法显示出更快、更灵敏的响应，因此它在生物传感器构建方面具有巨大的潜力，可用于工业、医学、毒理学和需要测量脂肪酶活性的常见实践。
参考：
[1]https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jo01083a610
[2]WO2007098418A1
[3]https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1155/2019/8538340
[4]https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/
1
