微生物

关于蛋白样品的氨基酸组成分析，我有两个问题？

首先，蛋白样品的消解，文献提到方法是：5.7mmol/l盐酸，在真空条件下110°C水解24h,或者150°C条件下快速水解90min.那么，真空条件是为什么？限于实验室条件，不用真空条件行不？第二，实验室检测仪器是UPLC,分析氨基酸需要衍生试剂，那么请推荐一些合适的衍生试剂，希望操作方便、无毒无害，精确性要求不是太高，谢谢大家！

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共7个回答

为她，不为我，化工研发 2018-04-03回答

真空应该是怕氧气把一些氨基酸给氧化了吧，不介意这点应该可以不真空或充氮气吧。其实我想顺便问下这个测试能不能用来定量样品中的蛋白质的？如果可以那得到的各种氨基酸的摩尔数是应该乘以对应残基的分子量还是 ... 我听说一般不用这个来做绝对定量，之前我们用对照品线性来做过蛋白绝对定量，不一定每次能做成一样的。相对摩尔数可以的。

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白玖，销售 2018-04-03回答

可以用裂解管裂解抽真空，或吹氮气。衍生试剂waters有柱前衍生试剂包，1290可以用，也可以用安捷伦的在线衍生做，加内标。

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顾凉.，设备工程师 2018-04-03回答

哦？可以直接在安捷伦1290上用吗？... 可以的

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德芙少女社.，化工研发 2018-04-03回答

waters好像有完整的氨基酸组分分析技术包，我觉得你可以下载下来参考到看看。

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寡寒.，设备维修 2018-04-03回答

真空应该是怕氧气把一些氨基酸给氧化了吧，不介意这点应该可以不真空或充氮气吧。其实我想顺便问下这个测试能不能用来定量样品中的蛋白质的？如果可以那得到的各种氨基酸的摩尔数是应该乘以对应残基的分子量还是对应氨基酸分子的分子量？

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锄禾当午，设备工程师 2018-04-03回答

waters好像有完整的氨基酸组分分析技术包，我觉得你可以下载下来参考到看看。哦？可以直接在安捷伦1290上用吗？

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岁月与世界，设备维修 2018-04-03回答

真空应该是怕氧气把一些氨基酸给氧化了吧，不介意这点应该可以不真空或充氮气吧。其实我想顺便问下这个测试能不能用来定量样品中的蛋白质的？如果可以那得到的各种氨基酸的摩尔数是应该乘以对应残基的分子量还是 ... 据我所知，蛋白质定量的话要用到考马氏亮蓝比色，并用小牛血清蛋白标定；测定氨基酸总量公认的方法是用茚三酮比色；各类氨基酸混合在一一起有个平均相对分子质量，具体忘掉了，

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