准确测定2-氰基-4-硝基苯胺的含量对于质量控制和其在染料领域上的应用至关重要。
背景：2-氰基-4-硝基苯胺是分散染料中极其重要的中间体。以它为重氮组份合成的分散染料如分散红 SE—GFL，分散蓝 SE—2R，分散蓝KB—FS 等耐晒牢度好，色光鲜艳，热熔温度低。以邻氯甲苯为初始原料经氨氧化、硝化、胺化制备2-氰基-4-硝基苯胺工艺是国家科技攻关项目，成本低，但工艺复杂，质量控制较困难。该产品在国际市场上有很大的需求。因此，如何控制产品质量成为制约2-氰基-4-硝基苯胺在国际市场上竞争力的决定因素。
高效液相色谱法测定：
1. 方法一：
郭波等人介绍了一种全新的用高效液相色谱仪测定 2 -氰基 - 4-硝基苯胺的方法，克服了现有国家行业标准中同分异构体对检测结果准确度的影响 ，具有十分重要的意义。该方法专属性强，操作方便，测定准确，灵敏度高，可作为2-氰基-4-硝基苯胺的质量控制方法。具体如下：
（1）2-氰基-4-硝基苯胺标准品的制备
选择熔点高，外观色泽鲜艳的2-氰基-4-硝基苯胺工业品，以乙醇作溶剂用重结晶法提纯三次，然后置于真空干燥箱中，在80℃条件下真空干燥24 h，取出装瓶，保存在玻璃干燥器内.用液相色谱仪进行检测为单一峰，即可作为色谱仪分析用标准品。
（2）液相色谱仪检测条件的选择和确定
选用254 nm作为检测波长。进样体积选择10 μl，试样浓度选择2 mg/ml，实际进样量20 ng左右是最佳参数。采用C18色谱柱的效果最好，为保证色谱分离的效果，选用了大连化学物理研究所国家色谱研究中心研制的加长4 mm×250 mm SpherisorbC18色谱柱，固定相粒度为5 μm。研究结果表明，采用甲醇/水/三氯三氟乙烷=70/27/3的三元体系流动相，能取得最佳的色谱分离效果.水的比例不宜再提高过多，不然，会出现三者不能互溶的情况.配制好的流动相必须经超声波脱气，否则容易在吸滤头内产生气泡，导致检测结果不准确。流动相的流速选择为1.0 ml/min时效果最佳。
（3）标准溶液的配制
准确称取2-氰基-4-硝基苯胺标准品200 mg置于100 ml标定好的容量瓶中，先用2 ml二甲基甲酰胺溶解，再用甲醇稀释至刻度，此标准溶液的浓度为2 mg/ml。
（4）标准曲线的制作
将上述配制好的2-氰基-4-硝基苯胺标准溶液用移液管分别吸取1，2，4，6，8 ml分别置于10 ml的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，依次分别进样检测.由C-R3A色谱数据处理机计算相应的标样峰面积值，绘制峰面积-进样量曲线，其线性方程为C=8.45642×10-4×A-2.07281。
相关系数为0.9999，式中:C为2-氰基-4-硝基苯胺的含量；A为色谱蜂面积。
（5）样品检测
准确称取50 mg左右的2-氰基-4-硝基苯胺工业品，先用2 ml二甲基甲酰胺溶解，再用甲醇稀释至刻度，摇匀，进样。由C-R3A色谱数据处理机计算出相应的色谱峰面积，并求得被测样品的含量。
2. 方法二：
王世宏等人报道了用高效液相色谱分析2-氰基-4-硝基苯胺含量的方法。用对-硝基苯胺为内标，分析波长340nm，定容溶液45％甲醇水。该方法比《中华人民共和国化工行业标准》HG2078-91规定的方法缩短操作时间三分之一，提高了分析精度，延长了色谱柱使用寿命，分析成本降低30％，所用试剂容易购买。
参考文献：
[1]郭波. 高效液相色谱仪测定2-氰基-4-硝基苯胺 [J]. 邵阳高等专科学校学报, 2001, (02): 116-118.
[2]王世宏,魏翠梅,周青叶. 2-氰基-4-硝基苯胺高效液相色谱分析方法的改进 [J]. 分析仪器, 1995, (04): 37-39.
[3]陈焕林. 2-氰基-4-硝基苯胺的高效液相色谱分析 [J]. 染料工业, 1986, (01): 19-23+59.
1
