提问
盖德化工网  >  盖德问答  >  PCR阴性跑出条带?

PCR阴性跑出条带?

做PCR时,做的阴性对照(未加模板)总是能跑出条带,换了酶,引物,水,枪头,PCR管,还是会出现。请问还应该考虑哪些因素,该如何解决?
PCR扩增的是细菌的16S
0评论 +关注
共7个回答
看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体
产物和目标产物一样大

再找更阴性的对照试试,比如不放酶,NTP,引物。感觉还是有污染。

1和2阴性对照,3和4目标产物




试剂污染
全都换了新的,还是不太行

看产物大小,可能扩增的是引物对二聚体

再找更阴性的对照试试,比如不放酶,NTP,引物。感觉还是有污染。
我试试

1. 是否是器械污染,比如上一次PCR反应时产物扩散到仪器内或移液枪污染(比如吸取菌液时倒灌到枪的管腔内)?如果是,换PCR仪器;建立UDG-dUTP防污染PCR;使用核酸清除剂彻底清扫实验器械与环境
2. 人为因素。可能不会有,但不排除有人给你使坏
相关问题
16S菌种鉴定菌株总是不纯!求助大神指点迷津!? 4个回答
蛋白纯化用的最多的方法? 2个回答
pcr空白对照弥散,样本整体弥散? 7个回答
毕赤酵母表达蛋白降解? 1个回答
SacB筛选问题? 1个回答
编辑推荐
三价铬溶液颜色问题? 15个回答
能否用离心代替旋蒸去除乙醇? 2个回答
想请教下靛蓝染料在紫外分光光度计下吸收的问题? 4个回答
硫酸钙结垢,用什么清洗掉? 4个回答
氰基取代苯环上的卤素的反应条件? 0个回答
 
请填写举报原因
选择举报原因
 
增加悬赏
剩余能量值
能量值