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芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体的应用及其结构分析? 1

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背景[1-3]

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体是一种多克隆抗体,能够特异性结合芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3,并广泛应用于体外检测。

经过x线晶体衍射结构分析,发现芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体由四条多肽链组成,链间通过不等数量的链间二硫键连接。抗体形成“Y”字型结构,称为抗体的基本单位。木瓜蛋白酶和胃蛋白酶是常用的Ig蛋白水解酶,可用于研究抗体的结构和功能,以及分离和纯化特定的多肽片段。

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3的免疫组化图

AADACL3是一种具有350个氨基酸的蛋白质,属于脂解酶家族,参与水解酶的活性。AADACL3存在两种交替剪接的同工型,由一个映射到人类染色体1p36.21的基因编码。染色体1是人类基因组中最大的染色体,占据了8%的基因组,编码了3000个基因。染色体1中包含许多与疾病相关的基因,如家族性腺瘤性息肉病、Stickler综合征、帕金森氏病、Gaucher病、精神分裂症和Usher综合征等。染色体1的异常存在于多种癌症中,如头颈癌、恶性黑色素瘤和多发性骨髓瘤。

应用[4][5]

拟南芥氨基脱氧分支酸裂解酶的生物学功能研究

植物中叶酸的合成过程包括pABA分支和喋啶分支。氨基脱氧分支酸裂解酶(ADCL)在pABA分支中催化氨基脱氧分支酸(ADC)芳香化为pABA。本研究使用拟南芥突变体Atadcl,通过基因突变、RNAi、超表达和原核表达等方法,探讨了拟南芥中氨基脱氧分支酸裂解酶(AtADCL)的生物学功能。

研究结果表明,基因AtADCL在拟南芥的各个时期和组织中广泛表达。通过T-DNA插入突变体SALK111981的PCR鉴定,得到了纯合突变体Atadcl,并分析了基因AtADCL的转录水平。

使用跨T-DNA插入位点的基因特异性引物,几乎无法检测到突变体Atadcl中该基因的转录本;而使用不跨T-DNA插入位点的基因特异性引物,则突变体中的转录本丰度明显下降。

突变体Atadcl在营养生长和生殖生长阶段与野生型无明显差异。统计了不同发育时期的莲座叶叶片数目,发现突变体与野生型的莲座叶叶片数目没有差异。在黑暗诱导的离体叶片凋亡过程中,突变体与野生型的叶片凋亡速率无明显差异。

生长在正常和氮限制培养基上的突变体幼苗状态均优于野生型,同时RT-PCR分析显示突变体中参与氮代谢途径的某些基因的转录本丰度高于野生型。

参考文献

[1]Folate biofortification in food plants[J].Samir Bekaert,Sergei Storozhenko,Payam Mehrshahi,Malcolm J.Bennett,Willy Lambert,Jesse F.Gregory,Karel Schubert,Jeroen Hugenholtz,Dominique Van Der Straeten,Andrew D.Hanson.Trends in Plant Science.2007(1)

[2]The diverse members of the mitochondrial carrier family in plants[J].Ilka Haferkamp.FEBS Letters.2007(12)

[3]Trienzyme Extraction in Combination with Microbiologic Assay in Food Folate Analysis:An Updated Review[J].Taisun H.Hyun,Tsunenobu Tamura.Experimental Biology and Medicine.2005(7)

[4]Investigation of the extraction behavior of the main monoglutamate folates from spinach by liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry[J].Guo-Fang Zhang,Sergei Storozhenko,Dominique Van Der Straeten,Willy E.Lambert.Journal of Chromatography A.2005(1)

[5]常娜宁.拟南芥氨基脱氧分支酸裂解酶的生物学功能研究[D].兰州大学,2010.

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