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任何浓度DMSO(0.01%~0.1%)都与干预药有协同作用?

最近在做细胞内信号转导通路PI-3K-Akt,关于它的抑制剂LY 294002的配制,说明书上写用DMSO,在做实验时设了vehicle(含等量DMSO)组,但发现DMSO对细胞(小胶质细胞)有影响,且DMSO与干预药有协同作用,MTT结果显示DMSO浓度>=0.1%即对细胞造成损伤,而任何浓度DMSO(0.01%~0.1%)都与干预药有协同作用,乙醇的结果亦如此。所以想请教,大家在配LY时是怎么配的?在使用LY时是否遇到了上述问题?


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共5个回答
你可以只加入DMSO做一个对照看看有没有影响
很奇怪很多人总是用DMSO来作溶剂来做药理的实验。不溶的化合物要用乳化剂、助悬剂或增溶剂来分散或溶解。乳化剂可用泊洛沙姆、助悬剂常用CMCNa,增溶剂可选用吐温80或CO40。用DMSO或甲醇溶解都是脱离现实的。DMSO倒是怎么说在外用制剂里面还是可以用一点的。甲醇是绝对不能用。如果一个化合物在氯仿中溶解度最好,是不是有人要用氯仿溶了去做药理实验呢?为什么许多“新药”只能停留在细胞实验里,停留在动物实验里,停留在纸上。这就是原因。因为,做的实验都是不考虑今后这个化合物可能要应用于人体的情况。就是做个实验拿点数据发点文章而已。文章发完,科研就终结了。
我猜说明书的意思是LY在DMSO中最少可以溶解5mg/ml吧,我不知道LY的分子量,你可以换算成摩尔浓度看是多少
不知道LY294002在DMSO中的溶解度有多少,如果可以的话,可以提高浓度,这样再加LY294002 的时候,DMSO的终浓度会小很多。我用的时候,一般保持DMSO终浓度<0.05%
前几天才配的LY294002,具体的溶解方法为,以325μl DMSO溶解5mg干粉形式的ly294002即可得到50mM的储存液。刚开始溶的时侯我也担心能不能全部溶解,配完之后才发现担心有点多余,呵呵。用测细胞增殖的方法,摸了一下药物浓度,以0.1-0.3%的DMSO做vehicle control,发现与空白对照也没什么差异。仅供参考!
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