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如何从酸枣仁中提取酸枣仁皂苷B? 1

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引言:

提取酸枣仁中的酸枣仁皂苷B是一个关键的工艺步骤。本文旨在探讨有效的提取方法,以最大化酸枣仁皂苷B的产量和纯度。


背景:

酸枣仁(Semen ziziphi spinosae, SZS)是鼠李科植物酸枣(Ziziphusjujuba Mill. Var.spinosa (Bunge) Hu ex H.F. Chou)的干燥成熟种子,具有镇静催眠、抗惊厥、抗焦虑抑郁、抗氧化、强心、改善学习记忆等作用,其主要活性成分包括皂苷及三萜类、黄酮类、生物碱类、多糖类、脂肪酸类等化合物,具有广阔的研究与开发前景。

酸枣仁具有广泛的药理作用,如镇静催眠、抗焦虑、抗抑郁、养心护肝等,其中具有高生物活性的皂苷类是发挥作用的主要有效成分之一,酸枣仁中的皂苷类成分主要包括达玛烷型四环三萜类、齐墩果烷型、羽扇豆烷型、五环三萜类。目前对于酸枣仁皂苷的研究,大部分集中于酸枣仁皂苷 A(JuA)与 JuB。


1. 酸枣仁皂苷B的理化性质

JuB 呈白色粉末状,溶于甲醇、乙醇、二甲基亚砜(DMSO)等有机溶剂,在乙醚中不溶解,熔点范围在228-231℃,分子量为 1045.21,分子式为 C52H84O21。它属于达玛烷型四环三萜类皂苷,药理作用较强,但是临床证明肠道吸收利用不充分。


2. 提取

2.1 方法一

魏芸等人报道了一种酸枣仁皂苷A和B的分离制备方法,采用逆流色谱法从酸枣仁皂苷提取物(正丁醇萃取的酸枣仁粗品原料或该粗品采用大孔树脂通过乙醇梯度洗脱获得70%乙醇:水洗脱组分)中分离制备出高纯度酸枣仁皂苷A和B,其溶剂可为正构烷烃、脂肪醇、脂肪酮、脂肪酯、腈类、醚类、水等溶剂,溶剂的组分可由其中的三个组分构成。具体步骤如下:


选取正己烷-乙醇-水在半制备型逆流色谱仪上来分离纯化酸枣仁皂苷提取物(正丁醇萃取的酸枣仁粗品原料或该粗品采用大孔树脂通过乙醇梯度洗脱获得70%乙醇:水洗脱组分),首先按8∶1∶8体积比将上述溶剂组分配置于分液漏斗中,摇匀后静置分层。待平衡一段时间后,将上相和下相分开,取下相作为固定相,上相作为流动相。采用半制备型高速逆流色谱仪,配有NS-1007泵,20mL进样阀,聚四氟乙烯柱,柱容积为240mL,8823A-UV紫外检测器,Yokogawa 3057便携式记录仪,FC-95自动馏份收集器。称取300mg正丁醇萃取的酸枣仁粗品原料溶解于20mL流动相中待用。进样前,先用固定相存满整个柱子,调整主机转速为800rpm,以2.0mL/min的流速将流动相泵入柱内;待整个体系建立动态平衡后,由进样阀进样;然后根据检测器紫外谱图,接收目标成分,其HPLC纯度达到96%左右。


2.2 方法二

雷海军等人报道了一种酸枣仁有效成分的综合提取方法。该方法采用超临界萃取法从酸枣仁中提取酸枣仁油脂类成分,得到酸枣仁油和酸枣仁渣,对酸枣仁油进行分子蒸馏技术提高脂肪酸的含量,再通过活性炭,白土脱色脱味精制处理,最后过滤得到可食用酸枣仁保健油;对酸枣仁渣通过乙醇回流提取,浓缩得到酸枣仁皂苷A和B总含量在15~25mg/g的酸枣仁提取物。该综合提取方法操作简单,可以提高酸枣仁原料的利用度,酸枣仁油得率高,可作为食用保健油;提取物中皂苷A和B的含量高,可以被加工成颗粒剂、胶囊剂和粉剂等剂型的原材料,也可以用于科研研究,对照品的制备,基础性研究实验。

实验得到酸枣仁原料中酸枣仁皂苷A和B含量的检测图谱如下:

参考:

[1] 广州合诚三先生物科技有限公司. 一种酸枣仁有效成分的综合提取方法:CN201610294334.3[P]. 2016-07-20.

[2] 北京化工大学. 酸枣仁皂苷A和B的分离制备方法:CN200710099681.1[P]. 2007-10-17.

[3]赵静. 酸枣仁皂苷B纳米粒的制备及其体内外评价[D]. 天津商业大学, 2022. DOI:10.27362/d.cnki.gtsxy.2022.000313.

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