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如何制备L-鸟氨酸盐酸盐? 1

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L-鸟氨酸盐酸盐是医药工业中重要的原料,也是细胞中重要的代谢产物,对于排除生物体内液态氨具有重要的调节作用。

制备方法

目前,关于酶法转化生产L-鸟氨酸盐酸盐的文献报道不一致。L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法主要有三种:化学法、发酵法和酶法。

1. 化学法

目前工业上最常用的生产方法是采用化学法,通过水解L-精氨酸制备L-鸟氨酸。1966年,Shell Int.Rearsch采用丙烯酸和氰化钠作为主要原料进行化学合成L-鸟氨酸。

2. 发酵法

利用某些菌株如大肠杆菌、空气杆菌、雷特格氏变种菌和奇异变种菌进行发酵生产L-鸟氨酸。其中,Shibuya等人利用Arthrobacter citreus 23-2A的变种菌株进行发酵生产L-鸟氨酸,发酵72小时,产量为35.2g/L。

3. 酶法

沈淑英等人利用粪链球菌ATCC8043、粪产碱杆菌ATCC21400和粪链球菌S-43的游离细胞转化底物L-精氨酸制备L-鸟氨酸,转化率为95-100%,提取收率为85-90%。1995年,M Kyriakos等人利用从动物肝脏中提取的精氨酸酶水解L-精氨酸用于多种L-鸟氨酸盐的制备。

上述酶法生产过程中,利用游离细胞转化底物L-精氨酸,转化液中会含有少量菌体蛋白和其他杂质,不利于产物的分离纯化。此外,转化后还需要去除菌体,降低产物得率,导致生产成本增加。

制备方法改进

一种改进的酶转化生产L-鸟氨酸盐酸盐的方法,操作简单,精氨酸转化率高,产量高。该方法包括以下步骤:

(1) 制备固定化酶

取三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂,用碳酸钾溶液浸泡后过滤,再将滤出的树脂与碳酸钾、溴化氢按质量比配制成反应溶液,于冰浴中反应,调节pH值,再加入精氨酸酶,与树脂的质量比为(0.002-0.01)∶1,反应后洗涤并用食盐水浸泡,最后洗净即可得到固定化酶。

(2) 优化转化条件

将制得的固定化酶与精氨酸、乙酸锰按质量比混合,溶于去离子水中,调节pH值,然后在适宜的温度下进行搅拌反应。

(3) 产物提取和精制

将混合液过滤后,加入活性炭,调节pH值,进行搅拌反应,然后过滤,浓缩滤液至有结晶析出,停止浓缩,加入醇类进行搅拌,最后过滤和干燥即可得到L-鸟氨酸盐酸盐。

参考资料

[1]苏建勇, 郑南华, 张建宇. 一种固定化酶法生产l-鸟氨酸盐酸盐的方法。

[2]刘爱福. L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法。

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