本文将讲述如何测定5,6,7,8-四氢喹喔啉及其生产原料如何合成，旨在为相关研究提供参考思路和实验支持。
背景： 5,6,7,8-四氢喹喔啉具备烤榛子、烤花生香的香气特征,是吡嗪类香料中用量较大的一种,其用量仅次于乙酰基吡嗪,广泛用于食用香精。
1. 测定：
鲍忠定等人建立气相色谱–质谱联用法（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）分离和测定香米中添加的5,6,7,8-四氢喹喔啉的方法。试样干燥后以无水乙醚为提取剂进行索氏提取，提取液经无水硫酸钠脱水、氮吹浓缩、无水乙醇溶解，提取物经HP-INNOWAX柱分离后进入质谱仪检测，外标法定量。该方法在5,6,7,8-四氢喹喔啉浓度0.5~10.0 mg/L的范围内具有良好的线性关系（R=0.9994），方法的精密度良好RSD为4.77%，加标回收率为81.00%~93.70%，方法的检出限 （RSN=3）为0.05 mg/L。实验方法如下：
（1）标准溶液的配制
准确称取按其纯度折算为100%质量的 5,6,7,8-四氢喹喔啉标准品100 mg，用无水乙醇溶解，配制成1.0 mg/mL的标准储备液，于4 ℃棕色瓶中避光保存。根据检测样品中5,6,7,8-四氢喹喔啉的测定要求，用无水乙醇配制成0.5、1.0、 2.0、3.0、5.0、8.0、10.0 mg/L的系列标准工作溶液，现用现配。
（2）样品前处理
稻谷样品经过实验砻谷机脱壳处理后，再通过实验室用碾米机进行碾磨处理，得到香米试样备用。将香米试样置于105 ℃电热干燥箱中干燥 30 min，冷却后，称取10.0 g香米颗粒样品，用滤纸包裹于索氏抽提器中，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚至接受瓶内容积的三分之二处，于45 ℃水浴上加热，回流提取2.0 h。取下接收瓶，回流液过无水硫酸钠柱干燥，于45 ℃水浴中充氮保护旋转浓缩至近干，氮气吹干，用无水乙醇 溶解、混合，并定容至2.00 mL。然后在4000 r/min 离心机离心分离5 min，取上清液过0.45 μm滤膜后供气相色谱质谱仪检测分析。
（3）色谱–质谱条件
色谱条件：色谱柱为HP-INNOWAX毛细管柱（30 m×0.25 mmi.d.×0.25 μm）；进样口温度为 230 ℃；载气为高纯氦气；流速为1.0 mL/min（恒 流）；柱温初始温度100 ℃，保持2 min后，以 10 ℃/min升至200 ℃，保持8 min；分流比15∶1；进样量1 μL。
质谱条件：电子轰击（EI）离子源；电离能量70 eV；离子源温度230 ℃；四极杆温度：150 ℃；连接线温度：280 ℃；溶剂延迟时间5.0 min；选择离子采集（SIM）。
2. 生产原料的合成：
邻位环二酮是香料 5,6,7,8-四氢喹喔啉的重要生产原料，5,6,7,8-四氢喹喔啉已知的合成方法一般为环已二酮和乙二胺缩合后氧化,而环己二酮并无大量市场化供应。因此考察邻位环二酮的生产工艺具有非常重要的意义。合成步骤如下：
（1）在0~50℃下，将亚硝酸酯用0.5~1小时通入或滴加到环酮中，在盐酸催化的条件下进行亚硝化，通入或滴加完毕后0~60℃保温反应0.5~6小时至反应结束，除去生成的醇类，邻位环二酮单肟固体析出，过滤，滤饼用于下一步的水解反应；
（2）将步骤（1）制得的邻位环二酮单肟加入到亚硝酸钠溶液中，在40~100℃下，滴加50%稀硫酸，滴加时间为1~3小时，滴加完毕后，在40~100℃温度下保温反应3~8小时，反应结束后用溶剂萃取，回收溶剂得到邻二酮粗品，经过重结晶精制得到邻二酮成品。
参考文献：
[1]鲍忠定,王东铭,王潇. 气相色谱–质谱联用法测定香米中添加的5,6,7,8-四氢喹喔啉[J]. 粮油食品科技,2022,30(3):171-176. DOI:10.16210/j.cnki.1007-7561.2022.03.019.
[2]余爱农. 5,7,7-三甲基-5,6,7,8-四氢喹喔啉的合成[J]. 香料香精化妆品,2000(2):1-2.
[3]爱普香料集团股份有限公司. 一种邻位环二酮的合成方法:CN201310044882.7[P]. 2014-08-06.
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