如何检测酰肼的存在? ¹

当羧酸的酰肼与碱金属氢氧化物发生皂化反应，并经醋酸酸化后，所产生的肼可以通过与过量的对－二甲胺基苯（甲）醛反应来进行检测。根据肼的存在量，会出现橙色至黄色的颜色变化。如果直接将酰肼的中性或弱酸性溶液与醛的酸溶液加热，也会发生相同的反应。显然，酰肼被酸类部分皂化，而肼则与醛反应，从快速建立的水解平衡中移去。在这个显色反应中，醛和肼缩合试验中，方程式（1）中形成的醛连氮（Ⅱ）会立即在酸中溶解并产生醌型阳离子（Ⅲ）：

将这个不发荧光的橙色或黄色溶液滴在滤纸上，（Ⅲ）的形成可以进行高度灵敏的检测。滤纸上留下的红色到粉红色斑点，在紫外光下会发出深红到鲑色的荧光。这个效应可以在很稀而几乎无色的溶液中观察到，可能是由于（Ⅲ）和滤纸形成能发荧光的被吸附物，根据（Ⅲ）的结构，应考虑到交换和加成两种吸附作用。滤纸上红色到鲑色的荧光斑点，经氨处理后会变为蓝-绿色；但经酸处理后，又会恢复红色荧光。这种可随意重复的荧光颜色变化，肯定是由于被吸附的（Ⅲ）和被吸附的（Ⅱ）互相转变。

芳族胺类也可以与对－二甲胺基苯（甲）醛缩合形成黄到橙色的希夫氏碱类。这种希夫氏碱类的浓溶液，在滤纸上会留下发绿色荧光的斑点，这些斑点浸于氨液酒精后即消失，再加酸化也不能恢复。但是希夫氏碱（Ⅱ）的蓝-绿色荧光斑点却会留在滤纸上，而滴以酸后，红色荧光又可恢复，因此，在纵有芳族胺盐存在的情况下，可以对酰肼类进行检测。

下面的实验方法需要使用过量的对－二甲胺基苯（甲）醛。对于检测酰肼含量不超过1％的溶液，所规定的试剂量已经足够过量。如果含量较浓，醛将与未皂化的酰肼在其自由－NH₂基团上缩合。这个缩合作用将产生一种发黄色荧光的产物。

操作步骤：将试液滴在微量试管中，加入醛的酸性溶液一滴，然后将混合物放入水浴中温热5～10分钟。冷却后的溶液，加入一滴水，取出一滴放在滤纸上。将纸浸泡在1：250的盐酸中，然后在紫外光下观察。红至鲑色的荧光表明存在一种酰肼。再浸泡在1：10的氨溶液中，斑点即变为蓝-绿色。

试剂：对－二甲胺基苯（甲）醛0．4克溶于20毫升酒精加2毫升浓盐酸。

以下物质的含量可以被检测出：

环状3－氨基酞酰肼（"鲁米诺"）没有反应。