如何使用Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒进行脂阿拉伯甘露聚糖的检测? ¹

Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行脂阿拉伯甘露聚糖的检测。在微量滴定板上包被抗体后，样品或标准品中的抗原与包被的抗体结合，洗去游离成分。接着加入生物素化抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与包被抗体结合的抗原结合，生物素和亲和素特异性结合形成免疫复合物，洗去游离成分。加入显色底物（TMB）后，在辣根过氧化物酶的催化下呈蓝色，加入终止液后呈黄色。

通过酶标仪在450nm波长处测定OD值，抗原浓度与OD450值成正比，通过绘制标准曲线计算出样品中指示剂的浓度。

如何操作Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒？

1. 标准品加样：在标准品孔和样品孔中加入不同浓度的标准品。

2. 加样：在待测样品孔中加入样品稀释液和待测样品。

3. 加酶：在每个孔中加入酶标试剂。

4. 孵育：用封膜封板，37°C孵育60分钟。

5. 洗涤：每孔加入洗涤液，重复洗涤步骤5次。

6. 显色：每孔加入显色剂A和显色剂B，37°C避光显色15分钟。

7. 终止：每孔加入终止液终止反应。

8. 测定：在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），测定应在加入终止液后15分钟内进行。

Human Lipoarabinomannan (LAM) ELISA试剂盒的应用

该试剂盒可用于脂阿拉伯甘露聚糖的提纯以及对肺结核的诊断价值的评估。通过从结核分枝杆菌中提取纯化脂阿拉伯聚糖，并使用免疫金过滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体，可以得出结核病的诊断结果。

研究结果显示，LAM抗原的检测具有理想的灵敏度和特异性，有望成为结核病血清学快速诊断方法之一。

参考文献

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