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如何使用人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒进行检测? 1

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人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行检测。该方法通过将抗体包被于酶标板上,样品或标准品中的抗原与包被抗体结合,然后加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合,生物素与亲和素特异性结合,形成免疫复合物。加入显色底物(TMB)后,TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。

使用酶标仪在450nm波长处测量OD值,抗原浓度与OD450值呈正比。通过绘制标准曲线,可以计算出样品中指标的浓度。

如何进行人脂阿拉伯甘露聚糖的检测?

以下是操作步骤:

1. 加入标准品:在标准品孔和样本孔中加入不同浓度的标准品。

2. 加入样品:在待测样品孔中先加入样品稀释液,然后再加入待测样品。加样时要轻轻晃动混匀。

3. 加入酶标试剂:每孔加入酶标试剂,除了空白孔。

4. 温育:封板后置于37℃温育60分钟。

5. 洗涤:揭掉封板膜,加入洗涤液,重复洗涤步骤5次。

6. 显色:加入显色剂A和显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

7. 终止:加入终止液终止反应。

8. 测定:以空白孔调零,依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

人脂阿拉伯甘露聚糖的应用

人脂阿拉伯甘露聚糖的提纯及其在肺结核诊断中的价值

通过提取纯化结核分枝杆菌(M.TB)脂阿拉伯甘露聚糖(lipoarabinomanan,LAM),并将其用于血清标本检测,评价其在肺结核诊断中的价值。通过一系列方法,成功提取到LAM抗原,并用免疫金渗滤法检测涂阳肺结核和对照血清标本中的LAM抗体。结果显示,血清LAM抗体检测对肺结核诊断具有较高的敏感性和特异性。

参考文献

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