本文将介绍如何测定药物中京尼平苷酸的含量，京尼平苷酸是一种常见的药物成分，在药品分析中具有重要的意义。通过详细讨论分析方法和技术步骤，我们可以更好地了解药物质量控制中的关键环节和操作要点。
简述：京尼平苷酸为环烯醚萜类化合物，在车前子、杜仲中含量较高，为杜仲中主要有效活性成分之一。有研究表明京尼平苷酸具有保肝利胆、修复损伤脊髓、提高记忆力、抗炎等多种生物活性。京尼平苷酸为京尼平苷一相代谢产物，两者结构相似，前者有抗炎活性。目前，京尼平苷酸的研究集中在含量测定、提取纯化、生物活性方面。
含量测定：
1. 报道一
王开裕等人建立了高效液相色谱法测定金匮肾气丸中马钱苷、京尼平苷酸、23-乙酰泽泻醇B和β-蜕皮甾酮的含量。方法具体为：将金匮肾气丸样品研细、甲醇超声提取后，用Capcell Pak UG C18色谱柱分离，柱温为28℃，京尼平苷酸、β-蜕皮甾酮、马钱苷和23-乙酰泽泻醇B检测波长分别设定为254、250、240、254 nm，进样体积为10μL，流速为1.0 mL·min-1，以乙腈为流动相A、3 mL·L-1磷酸溶液为流动相B，梯度洗脱，外标法定量检测。
京尼平苷酸、β-蜕皮甾酮、马钱苷和23-乙酰泽泻醇B质量浓度分别在0.049 5～4.95、0.098 1～9.81、0.019 7～1.97、0.098 3～9.83μg·mL-1范围内具有良好的线性关系；重复性RSD值(n=6)分别为1.62%、1.31%、1.76%、1.24%；平均加样回收率分别为100.05%、98.33%、99.97%、99.42%。该方法具有前处理简单、分析时间短、检测结果准确等优点，适用于金匮肾气丸的质量控制。
2. 报道二
闫占宽等人采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS)对五神汤中的化学成分进行鉴定，进而对五神汤中京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷6种成分进行含量测定。方法具体为：UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS法鉴定五神汤中的化学成分，采用ACQUIFY UPLCTMBEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm，1.7μm)进行分离，以0.1%甲酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱，检测波长为254 nm，柱温30℃；电喷雾离子源(ESI)全扫模式；根据一级质谱中的分子离子，推测化合物的相对分子质量和元素组成；再利用二级质谱信息，与对照品及文献报道中化合物信息库进行比对，推测五神汤的体外化学成分。HPLC法检测五神汤中京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷，Aglient Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 mm)，流动相为0.1%磷酸水(A)-乙腈(B)，梯度洗脱，检测波长254 nm，体积流量1.0 mL·min-1，柱温30℃，进样量10μL。
研究共检测到五神汤中的71种化学成分，主要包括黄酮类、酚酸类、三萜皂苷类以及香豆素类；6种成分在浓度范围内线性关系良好，平均加样回收率为89.6%～93.0%。京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷在10批样品中的平均质量浓度依次为2.92、2.48、1.72、1.38、2.08、1.77 mg·g-1。建立的UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS/MS、HPLC法可用于五神汤化学成分的鉴定和含量测定。
3. 报道三
那效旗等人建立了RP-HPLC-UV色谱法测定清心莲子饮的基准物质中京尼平苷酸的含量。方法具体为：采用依利特C18柱(Sinochrom ODS-BP，4.6mm×200mm，5μm)，0.5%的HAc溶液和甲醇进行梯度洗脱，流速控制为1.0m L·min-1，在254nm，柱温25℃下进样，进样量为10μL。
京尼平苷酸的含量与色谱峰面积呈现出良好的线性关系，其线性方程为Y=11.185X+0.065(R2=0.9999)。精密度、重复性和加样回收率等试验RSD均小于3%，平均加样回收率为101.05%，RSD为2.45%。该含量测定的方法可行，操作简易，灵敏度高，适于清心莲子饮的物质基准中京尼平苷酸的含量测定，可作为清心莲子饮质量评价的方法。
4. 报道四
闫桦等人建立能同时测定排石颗粒中木通苯乙醇苷B、京尼平苷酸和丹皮酚含量的RP-HPLC法。方法具体为：将排石颗粒研细后，加甲醇超声提取，滤过。以Agilent eclipse zorbax SB-C18色谱柱分离；检测波长:254 nm (京尼平苷酸)、273 nm (丹皮酚)和330nm(木通苯乙醇苷B)；流速1.0 mL min-1；柱温30℃；进样量10 μL；流动相A:甲醇，流动相B:0.5%冰乙酸溶液，采用梯度洗脱；二极管阵列检测器定量检测。
京尼平苷酸、木通苯乙醇苷B和丹皮酚依次在质量浓度0.981～98.1、0.393～39.3和0.199～19.9mg·L-1内有良好的线性，重复性RSD为2.61%、1.49%和2.02%，平均加标回收率依次为100.14%、99.70%和100.27%，溶液稳定性和仪器精密度均良好。该方法具有快速、准确等特点，适用于排石颗粒的质量控制。
参考：
[1]王开裕,林天东,吴振宁,等. 金匮肾气丸中马钱苷、京尼平苷酸、23-乙酰泽泻醇B和β-蜕皮甾酮含量测定方法的建立 [J]. 西北药学杂志, 2023, 38 (05): 48-52.
[2]闫占宽,张敏,刘钦伟,等. 五神汤化学成分鉴定及京尼平苷酸、秦皮甲素、咖啡酸、木犀草苷、β-蜕皮甾酮和毛蕊花糖苷定量检测 [J]. 药物评价研究, 2023, 46 (05): 1047-1056.
[3]那效旗,陈忠新,苟鑫宇,等. RP-HPLC-UV法测定清心莲子饮基准物质中京尼平苷酸的含量 [J]. 化学工程师, 2021, 35 (12): 20-22+64. DOI:10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20211220.
[4]肖晓燕,冯果,李玮,等. UPLC-MS/MS分析京尼平苷酸在大鼠体内的组织分布研究 [J]. 贵州医药, 2021, 45 (08): 1182-1185.
[5]闫桦,齐赛卿,王晶,等. RP-HPLC法同时测定排石颗粒中木通苯乙醇苷B、京尼平苷酸和丹皮酚的含量 [J]. 中国临床药学杂志, 2021, 30 (04): 285-288. DOI:10.19577/j.1007-4406.2021.04.010.
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