本文介绍了合成和纯化2'-氟-2'-脱氧尿苷的方法，这是一种重要的有机化合物，具有广泛的应用领域。
简述：2'-氟-2'-脱氧尿苷，英文名为2'-Fluoro-2'-deoxyuridine，分子式为C9H11FN2O5，可溶于甲醇，熔点为147.0- 153.0℃。2'-氟-2'-脱氧尿苷为核苷酸类衍生物，常用作用作医药中间体。
1. 合成：
步骤（1）将尿苷、碳酸二苯酯加于二甲基甲酰胺中，升温溶解，溶液澄清后，保持温度条件下加入催化剂碳酸氢钠，第二次升温反应，反应完成后，自然降温至室温，搅拌，过滤，滤饼烘干得化合物2；
步骤（2）将化合物2、无水氟化钾、催化剂三氟化硼乙醚溶于溶剂中，升温反应，反应完成后过滤浓缩，得化合物3，即2’?氟?2’?脱氧尿苷。
其中，步骤（1）)中化合物1：碳酸二苯酯的摩尔比为1：1.1，升温溶解的温度为58～62℃，第二次升温温度为78～82℃，室温为20～30℃，搅拌时间为1～3小时。步骤（2）中溶剂为二甲基甲酰胺或氯苯，化合物2：无水氟化钾的重量比为1～2:1，升温反应温度为120℃，反应时间为10-14小时。
2. 纯化：
（1）将粗品2’-氟-2’-脱氧尿苷溶于乙酸乙酯，加入三乙胺，控温下滴加酰化试剂反应；
（2）反应完成后加入甲醇，搅拌，降温析晶，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，滤饼烘干的化合物2；
（3）化合物2溶解于甲醇中，加入氢氧化钠，反应完全后过滤，滤饼烘干得2’-氟-2’-脱氧尿苷。
实验中，酰化试剂为醋酐或苯甲酰氯当中的一种。当步骤（1）中加入的酰化试剂为醋酐时，需要加入催化剂，催化剂为4-二甲氨基吡啶，2’-氟-2’-脱氧尿苷：三乙胺：酰化试剂的重量比为1:1～3:1～2。 步骤（1）控制反应温度在0-20℃，步骤（2）降温温度为-20～10℃，步骤（3）化合物2与氢氧化钠的摩尔比为1:1。
3. 应用：合成2’-氟-2’-脱氧腺苷
选取胸苷磷酸化酶(Thymidinephosphorylase,TP)与嘌呤核苷磷酸化酶(Purinenucleosidephosphorylase,PNP)作为生物催化剂,催化 2’-氟-2’-脱氧尿苷与腺嘌呤进行转糖基化反应生成2’-氟-2’-脱氧腺苷。具体步骤如下：
（1）TP与MF13的酶液制备；取TP湿菌体0.5g，加入10mL100mM磷酸缓冲液 (pH=7.0)重悬，设定超声破胞仪的功率为 400W，超声3s间歇6s，破碎细胞20min，将破胞后的菌液以13000rpm 离心20min，取上清液保存于-20℃冰箱备用。
（2）2'-氟-2'-脱氧尿苷3.125g，腺嘌呤4.175g，TP酶液100mL，MF13 酶液100mL，加入100mM磷酸缓冲液 (pH=7.0)300mL，反应温度48℃，转速800r/min，反应期间每隔12h取一次样，将样品在 100℃水浴 12s灭活，使用高效液相色谱仪检测。
参考文献：
[1] 滕海东. 2’--氟--2’--脱氧腺苷的核苷磷酸化酶催化合成技术研究[D]. 浙江:浙江大学,2020.
[2] 平江县吉成科技有限责任公司. 一种2’-氟-2’-脱氧尿苷的合成方法:CN202011452956.7[P]. 2021-03-16.
[3] 平江县吉成科技有限责任公司. 一种2’-氟-2’-脱氧尿苷的纯化方法:CN202011443647.3[P]. 2021-02-26.
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