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如何测定白果内酯的含量? 1

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白果内酯在医药领域具有广泛的应用,对白果内酯进行准确的分析至关重要。


简介:白果内酯是传统中药银杏叶的提取物的重要成分,作为提取物中唯一的倍半萜复合物,具有抗炎、抗氧化、降低血压、保护神经等多种生物学功能。


含量测定:

1. HPLC-MS法

佟若菲等建立了测定银杏叶片中银杏内酯A、B、C及白果内酯的HPLC-MS法。方法:采用HPLC-MS法,Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–10 mmol乙酸铵水溶液,梯度洗脱;柱温:30℃;体积流量:1 m L/min;进样量:10μL。采用离子阱(ESI)负离子模式进行检测,检测模式为母离子全扫描方式(Scan),并进行二次离子化扫描。雾化器压力310.28 k Pa,毛细管电压3.5 k V,碰撞诱导解离电压150 V,干燥气为N2,干燥器温度350℃,干燥气流量8.0 L/min。


银杏内酯A、B、C和白果内酯在0.100 62.012 0、0.102 02.040 0、0.050 01.000 0、0.101 62.032 0 mg/m L显示良好的线性关系;平均加样回收率分别为97.1%、97.0%、98.2%、97.8%,RSD值分别为1.73%、1.68%、1.76%、1.83%(n=6)。该法灵敏度高、选择性高、检测限低,为银杏叶片的质量控制提供依据。


2. HPLC法

倪琳建立脉平片中白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量测定方法。方法:采用HPLC对制剂中银杏叶提取物的主要成分白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C进行定量分析。CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6mm×250mm 5μm)流动相四氢呋喃-乙腈-水(12∶10∶78)蒸发光散射检测器柱温30℃流速1.0mL·min-1。


银杏内酯C在1.116.66μg白果内酯在2.23213.392μg银杏内酯A在1.91211.472μg银杏内酯B在1.5029.004μg均呈良好的线性关系平均回收率分别为96.36%97.18%97.71%96.57%RSD分别为1.0%1.4%2.1%1.4%。方法准确可靠专属性强结果稳定重复性好可有效控制制剂质量。


3. UPLC-TOF-MS法

张峥为比较鄂西南不同核用银杏品种叶片中银杏内酯和白果内酯含量采用超高压液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS)联用方法测定微量银杏内酯和白果内酯含量分析柱为ZORBAX C18(2.1×50 mm1.8μm)色谱柱流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液采用梯度洗脱飞行时间质谱作为检测器选择离子采集方式。方法测定银杏内酯和白果内酯的线性范围为0.24μg/m L相关系数为0.9996以上相对标准偏差小于1.65%。


4. HPLC-ESI-MS法

银杏萜类化合物包括白果内酯和银杏内酯是银杏叶或提取物中的主要药物成分。卢定强采用高效液相色谱(HPLC)-电喷雾电离(ESI)-质谱(MS)方法对银杏叶中的白果内酯和银杏内酯进行了分析。色谱柱为InertsilODS3,甲醇-水(36:64)为流动相,流量为1mL/min,温度为35°℃。采用ZMD微质量电喷雾电离(ESI)-质谱联用仪(MS)进行质谱分析。得到了样品的HPLC总离子图谱和选择离子图谱(m/z为325、407、423、439)以及色谱峰的ESI/MS质谱,从而鉴定了银杏叶中的白果内酯、银杏内酯A、B、C和」。该方法简便、快速,准确度高。


参考文献:

[1]徐新宇. 白果内酯对木瓜蛋白酶诱导兔骨关节炎改善效应的研究[D]. 东北农业大学, 2022. DOI:10.27010/d.cnki.gdbnu.2022.000247.

[2]佟若菲,林宏,李维超等. HPLC-MS法测定银杏叶片中银杏内酯A、B、C和白果内酯 [J]. 现代药物与临床, 2017, 32 (03): 386-389.

[3]倪琳,张秀娟,高进贤等. HPLC同时测定脉平片中白果内酯、银杏内酯A和银杏内酯B、银杏内酯C的含量 [J]. 中国实验方剂学杂志, 2015, 21 (06): 66-68. DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2015060066.

[4]张峥,叶小玉,肖强等. UPLC-TOF-MS快速测定不同核用银杏品种银杏叶中银杏内酯和白果内酯含量 [J]. 天然产物研究与开发, 2015, 27 (02): 286-288+300. DOI:10.16333/j.1001-6880.2015.02.019.

[5]卢定强,韦萍,欧阳平凯等. 高效液相色谱-电喷雾电离-质谱分析银杏叶中银杏内酯和白果内酯(英文) [J]. Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences, 2002, (02): 26-30.

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