嘌呤霉素慢病毒稳转株遇到的问题,食管鳞癌eca109细胞,确定嘌呤霉素的杀灭曲线。
用了2、4、6、8、10 ug/ml的浓度做了5个孔,24孔板铺板密度5*10(4),培养过夜后见细胞贴壁后加入不同浓度的含药物培养基。
3天以后发现各孔细胞均漂浮,无贴壁细胞。部分细胞死亡,部分细胞形态正常。形态正常的细胞各孔数量相差不大。
请问:1、接下来应该怎么办?将细胞收集离心后再用含药物培养基继续筛选吗?
2、为什么所有细胞都会漂浮?死了的细胞可以理解,正常的细胞不应该继续贴壁吗?
3、你们大概培养多少天才能出杀死全部细胞?