1. PVDF膜就成了亲水性的了。这个你在实验中也应该看到了。所以，只要用甲醇处理PVDF膜30s左右就可以完全的把PVDF膜从疏水性状态转变成亲水性的了，时间延长后效果都是一样的。另外，不要相信论文中的条件，具体条件还要靠自己去摸索，因为每个实验室的各种情况都不一样。...

细胞看上去不错啊。我不知道你说的全骨髓法是什么意思，但如果是得到的比较纯的干细胞的话，大概需要一周甚至更长的时间才能得到一定数量的细胞。要有耐心。 你可以在这一周的时间内换部分培养液。...

峰肯定是有的，只是不同电解液，不同浓度都有可能峰值不同，所以具体问题具体分析 也就是说我这个材料导电性是有的对吗 ...

我记得应该用乙醚提取？ 做过合成扁桃酸的实验，得到钠盐水溶液后用硫酸酸化，结果扁桃酸都析出了（好像在水中的溶解度不是很大？）然后用乙醚提取的，最后蒸干乙醚就得到了消旋的扁桃酸...

分析步中”使用下面的质量缩放，scale to 1e-5 ，如果下面最小目标 ”，提交，查看：1）动能比内能小很多，比如只有后者的百分之五，可视为准理态了，否则调缩放系数。2）要么就是先算小分析步后的结果，将其在前处理软件重画网格。 ...

流式检测的是流动的活动单细胞，挂下来肯定不行的

我自己的文章用的LPS货号是0111:B4，成功在巨噬细胞上激活NF kappa B入核，发在2分多的杂志。有个办法就是在google scholar上输入你的货号，会出来你有用的参考文章的，有5篇以上的，那就非常值得参考了。...

这太难了吧，好容易形成双键啊

既然四复孔均一，而且结果也有很意义的。我想是否会犯一个我曾经犯过的错误－－把24孔板的左右搞颠倒了？ miRNA转染细胞后可能会引起靶蛋白水平的升高，但在报告基因水平应该不会存在不降反而升高的情况。建议再重复一两次看看是否有重现性。 ...

是在做利拉鲁肽的一个中间体吧，然后用侧链的羧基再和赖氨酸的侧链氨基做反应，这样就是一个完整的利拉鲁肽中间体了，呵呵，当初你把另一个羧基也保护起来不就行了啊，然后选择性的脱掉。还有就是要是不保护也行，你的酰氯是不是和酸形成酸酐了，用水处理一下看看能不能水解掉。 ...

成盐后pH控制在多少？这个很重要，因为过量的碱会在加热的时候产生副反应。澄明度应该是有机物残留在钠盐中引起的。 ...

看你的意思，估计是要用棕榈酸来处理细胞吧。在血浆中，游离的脂肪酸就是和BSA结合在一起运输的，因为如果不和BSA结合，本来脂肪酸在生理pH值下溶解度就比较低，另外没有和BSA结合的游离脂肪酸对细胞是有毒性的，会诱导细胞自噬。 ...

如果就是看看catenin的表达情况和激活后情况，要激活catenin有很多方法，可以转染 或阻断GSK3的磷酸化等 看表达情况可以用免疫组化法 ...

实验室其他人做纹状体注射，查到的参数如下： anterior 0.8mm,lateral 2.0mm,ventral 3.6mm效果很好 ...

碱性条件下。表活，小防白的水溶性降低，需要增溶

主动型：依靠铰接千斤顶的主动伸缩使得盾构机前后部分发生弯折。盾构推进千斤顶固定在盾构机的后部，推进千斤顶的推力作用在盾构机的后部再通过铰接千斤顶传递到盾构机前部。被动型：依靠外力使铰接千斤顶伸缩，从而使盾构机前后部分发生弯折。盾构推进千斤顶油缸的后端顶在盾构机的前部，油缸的前部搁置在摆动支承上，推进千斤顶的推力直接作用在盾构机前部。 ...

一般需要共轭体系才会显色。这个分子没有共轭体系但比较大，有可能浓一些会显一点色。不妨用碘熏一熏看

贴壁培养的细胞提取蛋白可以消化下来后提取，也可以不消化直接提取，但是所用的裂解液的配方是不同的！我用的是后面的方法，结果挺好的。具体操作如下：首先记住一点：所有操作均在冰上进行！1）吸弃培养液， PBS洗3次；2） 加入cell lysis buffer，250ul/一小皿；3） 置摇床上要15min，注意此时是连着冰盒一起摇的，速度不要太大，以免将液体晃出；4）刮刀刮下细胞，移入EP管中；5）超声破碎，两到三次，每次2到3秒，注意将EP管置于装有冰快的小烧杯中；6）4度，12000rpm，15min ，离心；7）吸取上清至新的EP管中；8）测量蛋白浓度；9）-20度保存，所用的cell lysis buffer 的配方：Tris-cl pH 7.5 10mM （终浓度，下同），NaCl 150mM，SDS 0.1%，Triton-100 1.0%，A protein 10ng/ml，Leupeptin 2ng/ml，PmSF 1mM，我是把PmSF直接加到cell lysis buffer 里的，不是临用前加的，结果没有问题。...

1.一般来讲：组化和WB的结果应该是一致的，因为都是蛋白水平的检测，一个是切片的组织，而另一个是匀浆后的组织。但是，二者的结果也可以是不同的，比如可能的原因有 (1) 免疫组化的结果是假的。比如non-specific. 建议用另外一个抗体试试。还有找找文献中别人做的结果或推测。 (2)在WB试验中，材料的准备过程，你的蛋白被降解了。或者你的蛋白大么，转膜时间够长么？ (3)因为组织有很多其他细胞，是不是你的蛋白在其中某种细胞中表达比较低，而你的材料中含有这种细胞比较多。因为免疫组化可能放大了你的蛋白信号。纯化你要的细胞。 (4)如果在某个组织中，只有某一类型的细胞表达抗原，该类型细胞在该组织中又较少。这时虽然在单个的细胞内抗原表达量足够高，能通过免疫组化检测到，但有时上样量受限，western也无法检测了。 ...

一般用抗CD3McAb、IL-1α包被，包被的作用是使细胞更好的贴壁生长，增加细胞的数量，并且可以使细胞充分诱导，扩增，这部挺重要，做好了，培养的免疫细胞也具有很大的免疫活性。 ...