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肉碱盐酸盐(Carnitine Hydrochloride)是一种重要的制药成分,被广泛用于药物和保健品中。在肉碱盐酸盐的制备过程中,其对其他成分的分布具有一定的影响。本文将探讨制备肉碱盐酸盐时对其他成分的分布所产生的影响。 制备肉碱盐酸盐时,以下方面可能会影响其他成分的分布: 1. 反应条件:肉碱盐酸盐的制备通常涉及化学反应,其中可能使用酸、碱或其他催化剂。这些反应条件对其他成分的分布和转化起着重要作用。适宜的反应条件可以提高目标产物的产率和纯度,同时减少副产物或不良反应的生成。 2. 反应时间:反应时间是制备肉碱盐酸盐时需要考虑的另一个因素。过短的反应时间可能导致不完全的反应,从而影响目标产物的生成和分布。相反,过长的反应时间可能导致副产物的生成增加,对所需的产物分布产生负面影响。 3. 适当的溶剂选择:在制备肉碱盐酸盐时,溶剂的选择也是影响其他成分分布的重要因素之一。适当的溶剂可以提供合适的反应环境,并有助于溶解和转移其他成分。正确选择和使用溶剂可以促进目标产物的形成,并最大程度地减少不必要的副产物。 4. 反应物比例:在制备肉碱盐酸盐时,反应物的比例对于其他成分的分布也起着重要作用。过高或过低的反应物比例可能导致副反应的发生或反应不完全。因此,合理控制反应物的比例可以优化目标产物的生成和分布,提高制备过程的效率。 综上所述,制备肉碱盐酸盐时,反应条件、反应时间、溶剂选择以及反应物比例等因素都会对其他成分的分布产生影响。通过合理控制这些因素,可以优化肉碱盐酸盐的制备过程,提高产物的纯度和产率。这有助于确保肉碱盐酸盐的质量和效果,满足药物和保健品制备的要求。 ...
罗丹明B是一类以氧杂蒽为母体的碱性荧光染料,在醇溶液中具有强烈的红色荧光。由于它与辣椒的天然颜色相似,且价格低廉,着色力强,常被一些不法商贩添加在辣椒油等调味品中。本文将简要介绍从辣椒油中分离出违规添加的罗丹明B的方法. 低共熔溶剂 随着人们对环境保护意识的增强,超临界CO2、超临界水、离子液体等绿色溶剂开始得到关注。作为绿色溶剂中的成员,低共熔溶剂以其电化学稳定窗口宽、蒸汽压低、合成简单、成本低、无毒、可生物降解、溶解能力强等优点已在化学领域崭露头角。2003年英国 Leicester 大学的Abbott等人把低温共熔现象拓展到了季铵盐类的有机盐领域,并首次提出了低共熔溶剂(deep eutectic solvent, DES)的概念。 低共熔溶剂通常是由两种或三种廉价又安全的组分通过分子间氢键作用相互缔合而形成的稳定溶剂,一般选取季胺盐作为氢键受体,酰胺、羧酸和醇等作为氢键供体。低共熔溶剂在分离技术领域的主要应用有酸性气体分离、油中酚类物质分离、天然物质分离等。 提取罗丹明B 实验发现,由氯化胆碱和乙二醇按照摩尔比1:3合成的低共熔溶剂能够从辣椒油中有效地提取罗丹明B,操作非常简单,只需要向样品中加入1 mL上述低共熔溶剂,涡旋提取1分钟,离心去除上层油样(可加数毫升正己烷洗涤),再将剩余的提取液复溶上机检测即可。低共熔溶剂的应用减少了有机溶剂的使用,降低了有机试剂对环境的污染,提取方式更加绿色环保。 罗丹明B的检测 实验结果表明,当样品中存在罗丹明B时,通过酶标仪能检测到其特征的荧光信号,且随着罗丹明B浓度的增加,荧光信号也会增强,从而实现辣椒油中罗丹明B的快速定性检测。该方法将为食品的安全监管提供一种全新的便捷技术。 ...
氯化钾是一种含钾和氯的盐类金属化合物,呈现为白色立方形晶体,类似食盐,具有强烈的咸味。氯化钾主要用于治疗各种原因引起的低钾血症,以及洋地黄类药物中毒引起的频发性、多源性早搏或快速心律失常、低钾性肌无力等。临床常使用高浓度的氯化钾注射液。 主要应用 首先,在工业领域,氯化钾主要被用于无机工业中,作为制造各种钾盐或碱如氢氧化钾、硫酸钾、硝酸钾、氯酸钾、红矾钾等的基本原料。在染料工业中用于生产G盐、活性染料等,同时在钢铁热处理剂以及照相行业中也得到了广泛的应用。 其次,在农业领域,氯化钾则是一种重要的钾肥。其肥效快,直接施用于农田,能使土壤下层水分上升,具有抗旱的作用。但是,需要注意的是,在盐碱地以及对烟草、甘薯、甜菜等作物不宜施用氯化钾。 此外,氯化钾在医药方面还被用作利尿剂及防治缺钾症的药物。 ...
十三氟辛基三甲氧基硅烷是一种含氟烷基官能团的硅烷,在常温常压下为无色透明液体。它具有耐热性高、耐化学稳定性高、表面自由能低等优点,适用于多种抗静电面料、混凝土憎水防污剂等精细化工产品的生产。此外,十三氟辛基三甲氧基硅烷还具有抗紫外、耐候性、耐摩擦等优异性能,可用作表面改性剂,使表面具有憎水/油的特性。 图1 十三氟辛基三甲氧基硅烷的性状图 化学性质 十三氟辛基三甲氧基硅烷的化学结构中含有多个碳氟键和氧硅键,具有优异的化学稳定性和憎水、憎油的特点。它可用于溶胶-凝胶原料、氟硅树脂合成原料、颜料表面改性等工业应用。 工业应用 十三氟辛基三甲氧基硅烷可用于文物、砖石的防水防污、混凝土制品的防水斑、陶瓷、大理石表面防水等领域。它还可用于金属、天然纤维制品、玻璃、木材等材料的防水防污、抗紫外线涂层等处理。 参考文献 [1] 卫晓利,张发兴.环保型无机-有机聚氨酯超疏水性涂层的制备[J]. 中国胶粘剂, 2014, 23:3. ...
核糖核酸简称RNA,由核苷酸单元组成,每个核苷酸由一个核糖糖分子、一个氮碱基和一个磷酸基团组成。RNA分子的功能与DNA相似,是细胞内的遗传物质之一,能够传递遗传信息,参与蛋白质的合成等生命活动。 主要作用 核糖核酸是人体的核心物质,是基因的本体,对蛋白质合成发挥着重要作用,主宰着人体生长、发育、繁殖、遗传等一切重大生命活动,核酸营养是维持正常细胞免疫的必需营养物质,可以提高机体免疫力,尤其是提高细胞免疫的功能;调节内分泌清除自由基;促进细胞分裂、再生与修复,增强代谢,对术后伤口愈合、受损细胞修复、肝细胞再生等都有很好的作用;抗癌;恢复放化疗和药物所致的损伤;增强记忆力,改善脑血管性痴呆;扩张血管,抵制血小板聚集和胆固醇生成;糖尿病及并发症康复;维持肠道正常菌群;减肥;调节人体营养均衡等。 核糖核酸还可提高机体对环境变化的耐受力,具有显著的抗疲劳、增强机体对寒暑的抵抗力,促进氧气利用等作用。 ...
本文综述了 S- 吲哚啉 -2- 羧酸的经典合成方法,包括传统化学合成路线和最新的催化合成技术。通过对比不同方法的优缺点,旨在为研究人员提供全面的合成策略选择参考。 背景:目前, S- 吲哚啉 -2- 羧酸的合成主要有化学合成和酶法合成两种途径。化学合成采用化学拆分和化学不对称合成来制备手性中间体,这两种方法均存在诸多问题,如化学拆分需要使用大量的拆分剂,反应步骤长,能耗高以及废物排放量大;基于过渡金属手性配体催化氢化体系,存在着催化剂昂贵、配体合成复杂、问题。这使得传统化学合成途径因环保和成本问题受到极大冲击。 酶法合成 S- 吲哚啉 -2- 羧酸的研究从十几年前已开始有报道。帝斯曼制药公司 (WO2006069799) 公开了利用表达在大肠杆菌的具有苯丙氨酸解氨酶活性菌泥直接催化合成 L- 邻卤苯丙氨酸,后经氯化亚铜催化环化合成 S- 吲哚啉 -2- 羧酸,手性纯度达到 99 %。然而上述利用苯丙氨酸解氨酶进行手性氨基酸制备的研究中,底物浓度低 ( < 30g/L) ,产能有限,限制了其工业化应用。 酰胺水解酶具有高效专一、立体选择性好、反应条件温和优点,且相比化学法生物酶催化法更加绿色、环保、经济。 1. 不对称手性转化法 专利 CN 116655519 A 发明涉及一种 S -(-)-吲哚啉-2-羧酸的不对称手性转化方法。主要解决其手性不对称转化方法缺乏的技术问题。该发明转化方法包括以下步骤:第一步, RS -吲哚啉-2-羧酸和 D -酒石酸在乙酸溶液中,加热到,在醛类催化剂催化下经席夫碱反应生成化合物 1 ;第二步,化合物 1 溶解于水中,用碱中和得到目标化合物 2 。 其中第一步 D -酒石酸的加入量为 2 -3当量,醛类催化剂加入量为 0.1 当量。 D -酒石酸的加入量为 2 当量。所用醛类催化剂为水杨醛、苯甲醛、正丁醛中的一种。反应在 70 -100℃下进行,反应时间为 6 小时;第二步反应碱为氨水、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或者碳酸钾中的一种。碱中和 pH 值控制到 3.5 -4.0。 2. 生物催化制备法 专利 CN 112195202 A 公开了一种 S -吲哚啉-2-羧酸的生物催化制备方法。具体步骤如下:化合物Ⅰ在碱性条件下与丙二酸二烷基酯进行烷基化反应得到化合物Ⅱ;化合物Ⅱ进行氨解得到二酰胺化合物Ⅲ,该化合物在青霉素酰化酶催化下,进行不对称酰胺水解反应,得到立体专一性酰胺羧酸化合物Ⅳ;化合物Ⅳ经霍夫曼降解,分子内环化反应得到关键中间体S-吲哚啉-2-羧酸化合物Ⅵ。该发明绿色,安全,经济,产品光学选择性强,手性纯度大于99%,且酶催化反应底物浓度大,适合工业化生产。 其中步骤 (1) 所述的碱性条件所用试剂为甲醇钠、乙醇钠、钠氢、叔丁醇钠、氢氧化钠、叔丁醇钾、氢氧化钾或者碳酸钾;反应溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、环己烷、甲苯、四氢呋喃或者二氧六环。步骤 (2) 中氨解反应所用试剂为氨水或者氨气有机溶剂溶液;反应溶剂为甲醇,乙醇,异丙醇,二氧六环,四氢呋喃;步骤 (3) 中所述青霉素酰化酶为游离形式的酶、固定化酶或菌体形式的酶。其青霉素酰化酶基因构建在表达载体上。化合物 Ⅲ 的浓度为 50-1000g/L 。青霉素酰化酶菌体用量与底物的重量比为 0.01:1 。步骤 (4) 中反应溶剂为水、甲醇、乙醇、甲苯、二氧六环、二氯甲烷或者上述溶剂任意组合;碱性条件所用碱为氢氧化钠、氢氧化钾或者氢氧化锂。 参考文献: [1] 甘肃皓天医药科技有限责任公司 . 一种 S- 吲哚啉 -2- 羧酸的生物催化制备方法 :CN202010961795.8[P]. 2021-01-08. [2] 上海吉奉生物科技有限公司 . 一种 S-(-)- 吲哚啉 -2- 羧酸的不对称手性转化方法 :CN202310692825.3[P]. 2023-08-29. ...
4-肼基苯磺酸,又称为对肼基苯磺酸,是一种在食品、医药和染料工业中广泛应用的重要化工中间体。它的结构含有磺酸基和肼基,呈现白色或黄色结晶。 图一:4-肼基苯磺酸 合成方法 目前合成4-肼基苯磺酸的方法主要是以对氨基苯磺酸为原料,通过重氮化反应得到相应的重氮盐,然后在还原剂(如锌粉、亚硫酸钠等)的作用下制得目标产物。重氮盐在室温下的空气中不稳定,时间久了会发生变质,稍高的温度也会导致重氮盐分解并释放氮气。因此,在反应过程中需要对所有仪器进行冷却处理,并且分离提纯操作必须迅速进行,以避免重氮盐的分解对反应收率的影响。 姬金岭等人对合成工艺进行了改进,采用了一锅法直接进行还原反应,避免了重氮盐的分离提纯步骤。他们研究了溶解对氨基苯磺酸的碱种类、重氮化反应中浓盐酸的用量以及反应温度对产物收率的影响,并利用正交实验对合成工艺进行了优化。具体的合成路线如下: 图二:4-肼基苯磺酸的合成 具体的合成步骤如下:向5%氢氧化钠水溶液(11.5 mL)中加入无水对氨基苯磺酸(2.00 g,0.0116 mol),待固体完全溶解后加入亚硝酸钠(0.80 g,0.0116 mol),充分搅拌。将浓盐酸(7.0 mL)和水(11.5 mL)混合置于冰浴中,控制体系温度在0~5℃,加入上述混合溶液,保温反应约20分钟。向反应体系中加入亚硫酸氢钠(3.57 g,0.0343 mol),用10%氢氧化钠溶液调节pH至6左右。移除冰浴,将反应体系升温至80℃,加入40%硫酸溶液(10 mL),保温反应1小时。反应结束后,将溶液冷却至室温,静置抽滤,用水洗滤饼2~3次,得到白色粉末状固体1.50 g,收率为68.8%。确定了4-肼基苯磺酸的合成工艺条件为:5%氢氧化钠溶液用量为11.50 mL、浓盐酸用量为8.00 mL、还原反应温度为100℃。 参考文献 [1]姬金岭,樊平平,赵慧等.对肼基苯磺酸的合成工艺研究[J].化工时刊,2023,37(01):16-19. ...
8-溴-2,4-二氯喹唑啉是一种喹唑啉类衍生物,主要用作医药化工合成中间体。如果吸入8-溴-2,4-二氯喹唑啉,请将患者移到新鲜空气处;如果皮肤接触,应脱去污染的衣着,用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤,如有不适感,就医;如果眼睛接触,应分开眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗,并立即就医;如果食入,立即漱口,禁止催吐,应立即就医。 结构 制备方法 8-溴-2,4-二氯喹唑啉的制备方法如下: 步骤1:向装有2-氨基-3-溴苯甲酸(67.0g,310mmol)的2000mL烧瓶中加入水(750mL)和AcOH(18.8mL)。将悬浮液加热至35℃。在35℃下滴加NaOCN(30.82g,403mmol,85%纯度)的水(250mL)溶液。将反应混合物在35℃下搅拌2小时。分批加入NaOH(415g,10.38mol),在加入期间将反应温度保持在40℃以下。混合物在短时间内变澄清,然后形成灰白色悬浮液。将反应混合物冷却至室温,并过滤。将获得的固体溶解在热水中,通过添加6N HCl将pH调节至5。将所得混合物冷却至室温,过滤收集沉淀物,用少量DCM,冷MeOH,乙醚冲洗,然后真空干燥,得到标题化合物8-溴喹唑啉-2,4-二醇,为灰白色固体(43.32g,58%)。 步骤2:向装有8-溴喹唑啉-2,4-二醇(39.61g,164mmol)的烧瓶中加入PCI5(68.4g,328mmol)和POCl3(250mL)。将混合物在110-1200℃回流过夜,并连接干燥管。在真空下除去POCl3。加入甲苯以共沸剩余的POCl3。将残余物加入DCM(300mL)中,用饱和NaHCO3(500mL)洗涤,过滤并经Na2SO4干燥。将有机层真空浓缩,并将残余物通过色谱法纯化,得到标题化合物8-溴-2,4-二氯喹唑啉,为白色固体(34.67g,76%)。 主要参考资料 [1] PFIZER PRODUCTS INC. Patent: WO2007/125405 A2, 2007 ; Location in patent: Page/Page column 25; 81 ; WO 2007/125405 A2 ...
Recombinant Rat MIP-1α/CCL3是一种细胞因子,由两个肽链组成,相对分子量约为8000。它在人体内的受体有CCR1、CCR5和CCR9,这些受体属于G蛋白偶联受体。当Recombinant Rat MIP-1α/CCL3与这些受体结合时,会产生瀑布样细胞活化作用,从而引导趋化炎症细胞到达效应部位。 除了对单核细胞、中性粒细胞等产生趋化作用外,Recombinant Rat MIP-1α/CCL3还参与NK细胞和NTL介导的细胞溶解作用,参与炎症和肿瘤局部免疫过程,以及介导其他细胞因子的释放。它在肿瘤免疫中可以促进单核巨噬细胞系统产生MIP-3a来加强其对DC的趋化作用,还可以促使CD4+T、CD8+T释放炎性细胞因子来减免肿瘤生长。然而,Recombinant Rat MIP-1α/CCL3也可以促进肿瘤癌灶区域血管形成,增强癌细胞和血管内皮的粘附作用,从而促进肿瘤的转移。 在血液系统疾病方面,Recombinant Rat MIP-1α/CCL3是一种造血负调控因子,能抑制造血干细胞或早期的祖细胞的分裂细胞,能特异性地将正常的CD34+细胞抑制于G0/G1期。在多发性骨髓瘤患者中,MMP-2、MMP-9、VEGF、CCL3和IL-6的水平均显著高于稳定期多发性骨髓瘤和正常对照组,这表明Recombinant Rat MIP-1α/CCL3与多发性骨髓瘤的发生和发展密切相关。 Recombinant Rat MIP-1α/CCL3的生理功能是如何发挥的? Recombinant Rat MIP-1α/CCL3在生物体内的特异性受体有CCR1、CCR5和CCR9。这些受体在细胞表面分布存在差异,并参与不同的免疫调控作用。CCR1可表达于各类免疫细胞表面,对免疫细胞到达炎症部位产生募集效应。CCR5是白细胞的一种表面蛋白,参与T细胞免疫调节作用。最新研究证实CCL3与CCR5特异性结合后可导致口腔癌的发生。CCR9多表达于小肠和结肠的T淋巴细胞表面,参与胃肠道免疫功能调控。 目前尚无研究证实CCL3可与h BMSCs表面某个受体特异性结合,同时也没有关于h BMSCs膜表面这些受体表达情况的研究。因此,我们的研究检测了这些受体在h BMSCs的表达情况以及CCL3诱导后受体的表达差异。研究结果显示,h BMSCs细胞膜表面存在CCR1、CCR5和CCR9这三种表面蛋白,CCL3作用后CCR9的表达量明显增大,CCR1和CCR5的表达量无显著差异。这表明Recombinant Rat MIP-1α/CCL3可能主要通过与CCR9特异性结合来参与对h BMSCs分泌外泌体的调控,相关机制需要进一步深入研究。 参考文献 [1] CCL3参与调解骨髓间充质干细胞分泌外泌体机制的研究.段锋祺 [2] CCL3促进人骨髓间充质干细胞增殖并抑制其外泌体的分泌 段锋祺 陈丽璇 周兆 高扬 [3] Wang Y, Gao A, Zhao H, et al.Leukemia cell infiltration causes defective erythropoiesis partially through MIP-1α/CCL3[J].Leukemia, 2016, 30 (9) :1897-1908....
鼠抗体测序服务提供卓越的抗体测序服务,利用"Database Assisted Shotgun Sequencing"(DASS)技术,可以测序各种亚型和形式的抗体,如IGM、荧光偶联抗体、固定化抗体和不同物种的抗体等。该技术利用先进的质谱仪和强大的数据处理算法,生成大量序列信息,并通过最新的计算程序对MS/MS光谱进行从头测序,从上万条MS/MS光谱数据中提取目标抗体序列信息。 小鼠是单克隆抗体生产的主要宿主动物,也是多克隆抗体生产的宿主。而大鼠则特别适用于制备对小鼠蛋白质具有限制特异性的IgG型抗体,也是制备IgE抗体的首选动物。仓鼠和豚鼠对小鼠的种系发生距离比大鼠更远,因而可用于制备抗小鼠蛋白质类的抗体。 鼠抗体测序服务的服务类型有哪些? 1.等重氨基酸测序: 利用MS测序方法可以分辨大多数等重氨基酸复合物,如W可与GE、AD、SV区分,R可从GV中区别出来,Q可从GA、K中区别出来,N可从GG中区别出来。 2.运用DASS技术对V、J、C片段测序 目前已有的一些数据库(如NCBI)虽包含抗体V、J、C片段序列,但是在抗体成熟的过程中,一个B细胞中的抗体基因要经过体细胞突变的过程才会产生高亲和力的成熟抗体。采用独特的计算方法,并能匹配相应物种的突变肽段,保证每条肽段都会被检测到,且每一个氨基酸位点都会生成20-7-条MS/MS光谱,对最难测序的proline和arginine的肽段也可实现测序。 3.CDR3区测序 抗体轻链的CDR3区多由胚系基因编码,而重链的CDR3区则由D基因编码,D基因大部分区域由于受到核酸酶及末端转移酶等重组酶的作用而发生基因重排,导致抗体重链CDR区在数据库中无法进行同源对比,而只能对其进行de novo测序。高质量的质谱数据与高效率的数据挖掘算法的结合,使我们对抗体CDR3区域的解读更为有力,我们可以测得数据库中无同源序列的20kDa的蛋白质。 鼠抗体测序服务在哪些应用领域有价值? 鼠抗体测序服务可用于人鼠嵌合抗体的基因构建实验中抗体测序服务。 为了克服鼠单克隆抗体在人体治疗中出现的问题,经典的基因工程抗体技术将人源抗体恒定区替代鼠抗体的恒定区,即构建人鼠嵌合抗体。嵌合抗体不仅保留了亲本抗体的特异性和亲和力,大大降低了人抗鼠抗体(HAMA)反应,而且可表现出不同的生物学功能和半衰期。 参考文献 [1]Monoclonal antibodies and im-munoadhesins approved for therapeutic use are on the market.Wu Y,Truong L,Lefranc MP. [2]Mouse/human chimeric Me1-14antibody:genomic cloning of the variable region genes,linkage to human constant region genes,expression,and characterization.Batra SK,Niswonger ML,Wikstrand CJ,et al.Hybridoma.1994 [3]Human IgG Cγ1domain is cru-cial for the bioactivity of the engineered anti-CD20antibodies.Geng SS,Feng JN,,Yan L,et al.Cel Mo Immunol.2007 [4]Chimeric human antibody molecules:Mouse antigen-binding domains with human constant region domains.Morrison SL,Johnson MJ,Herzenberg LA,et al.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.1984 [5]Specific amplification of rearranged immunoglobulin variable region genes from mouse Hybridoma cells.Gavilondo-cowley J V,Coloma M J,Vazuez J,et al.Hybridoma.1990 [6]Rapid production of full-length cDNAs from rare transcripts:amplification using a single gene-specific oligonucleotide primer.Frohman M A,Dush M K,Martin G R.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of Amercia.1988 [7]胡迪超,张爱华,杨晓明.人鼠嵌合抗体的基因构建[J].中国生物制品学杂志,2009,22(09):933-936...
肾小球系膜是一种特殊的间充质组织,位于肾小球毛细血管襻的中心部位。它由系膜细胞和系膜基质组成,与肾小球毛细血管的内皮相邻。肾小球系膜具有多种生理功能: (1) 对肾小球毛细血管袢有支持和保护作用; (2) 通过系膜的吞噬功能及系膜通道可将血浆大分子物质转运、清除; (3) 通过系膜细胞的收缩和舒张,控制毛细血管的血流量,调节肾小球的滤过功能及系膜通道功能; (4) 系膜细胞上具有Fc、C 3b 受体,可参与免疫反应; (5) 系膜细胞可释放多种炎症介质,通过自分泌及旁分泌途径参与肾小球炎症反应; (6) 系膜细胞可产生多种细胞外基质,参与基底膜的修复与更新,在病理情况下导致肾小球硬化。 HBZY-1/大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)常用于肾病发生机理的临床研究,也可用于构建动物模型。 HBZY-1/大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)的传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次,细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染。HBZY-1/大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)的复苏步骤如下: 1)把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里。 2)把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟。 3)把上清液倒掉,加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动,使培养皿中的细胞均匀分布。 4)标好细胞种类和日期、培养人名字等,放到CO2培养箱中培养,细胞贴壁后换培养基。5)3天换一次培养基。 HBZY-1/大鼠肾小球系膜细胞EC(HBZY-1)的传代步骤如下: 1)培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。 2)把原有培养基吸掉。 3)加适当的胰蛋白酶(能覆盖细胞就行),消化1-2分钟。 4)细胞都变圆后加入等体积的含血清的培养基终止消化。 5)用移液枪吹打细胞,把细胞都悬浮起来。 6)把细胞吸到15ml的离心管中,1000转离心5分钟。 7)倒掉上清液,加1-2ml培养基,把细胞都吹起来。 8)根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般,癌细胞分5个,正常细胞传3个。继续培养。 主要参考资料 [1] 内科学·第一卷 ...
背景及概述 [1] 大肠杆菌经过特殊处理后可以摄取外源DNA,这种状态下的细胞被称为感受态细胞。Shuffle T7-K12菌株是一种适用于T7启动子启动的蛋白表达的大肠杆菌菌株。该菌株中的DsbC酶不仅有利于正确形成蛋白的二硫键,还具有分子伴侣的功能,可以帮助不含二硫键的蛋白正确折叠。此外,Shuffle T7-K12菌株还具有降低基因背景表达的lac阻遏蛋白,以及抗T1噬菌体感染的特性。经过特殊工艺制作的Shuffle T7-K12感受态细胞的转化效率大于10^6 cfu/μg DNA。 基因型 [1] F'lac, pro, lacIQ / (ara-leu)7697 araD139 fhuA2 lacZ::T7 gene1?(phoA) PvuII phoRahpC*galE(orU) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (SpecR, lacIq) trxB rpsL150(StrR) gor (malF)3 菌株抗性 [1] Shuffle T7-K12菌株对氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和四环素敏感,对链霉素和壮观霉素具有抗性。 质粒转化步骤 [1] 1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后,加入1-5μl含有1-100ng的质粒DNA到细胞中,用手指拨打管底,轻轻混匀; 2. 冰水浴中放置30分钟,不要晃动; 3. 42℃热击60秒钟,不要晃动; 4. 冰水浴中放置2分钟,不要晃动; 5. 加入500μl的室温的SOC或LB培养基; 6. 置于30℃摇床中,150-200rpm,复苏培养60分钟; 7. 取50-100μl菌液涂布在含有抗性的LB平板上。待液体吸干后,倒置平板30℃培养12-24小时。 (平板划线分离法:复苏培养结束后,12000rpm离心30秒钟,弃掉上清,留100μl左右的液体,用200μl吸头轻轻吹打散菌块,取10μl重悬的菌液分多点滴在平板上,倾斜吸头,用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。) (质粒快速转化步骤:将步骤2的时间缩短到5分钟,对于氨苄青霉素抗性的质粒,步骤4完成后,可直接涂布或划线于含抗生素的平板上。其它抗性的质粒仍需40-60分钟的复苏培养。) 蛋白表达步骤 [1] 1. 挑取单菌落,接种到含有抗生素的LB培养基中; 2. 在30℃,200rpm的条件下震荡培养细菌至对数生长期(OD600=0.4-0.8); 3. 加入IPTG到终浓度为0.4mM,30℃诱导4小时或16℃诱导过夜; 4. 诱导完成后,离心收集菌体,用合适的方法(如考马斯亮蓝染胶法、Western-Blot法或酶活性分析法)分析菌体裂解物的总蛋白、上清和沉淀组分,明确表达产物的表达状况(可溶性或不溶性表达); 5. 当需要大量表达重组蛋白时,可将10ml过夜培养物转接到1L培养基中,当培养到OD600=0.4-0.8时,加入终浓度为0.4mM的IPTG,30℃诱导4小时或16℃诱导过夜(不同蛋白表达的最佳条件有所不同,需在实验中优化)。 主要参考资料 [1] Shuffle T7-K12 感受态细胞说明书 ...
平滑肌细胞是构成平滑肌的纤维状长细胞,具有很大的弹性和韧力。它们的胞质通常呈均质性,在染色切片上不显出任何结构。平滑肌细胞外面包裹着一层肌膜,并被少量纤细的胶质纤维、弹力纤维和网状纤维所包围。平滑肌细胞可以根据环境的改变而伸长或缩短。 平滑肌细胞的生理功能是什么? 平滑肌细胞在心血管疾病的发生和发展中起着重要作用。研究人主动脉平滑肌细胞可以探讨心血管疾病相关发病机制,对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具有重要意义。 研究表明,氧化修饰型脂蛋白对培养人主动脉平滑肌细胞的形态和表型有影响。在氧化修饰脂蛋白的作用下,平滑肌细胞的形态发生变化,胞体变大,形状由梭形变为不规则多边形,突起变得细而长。此外,氧化修饰脂蛋白还会影响平滑肌细胞的生长方式和细胞内的结构。 主要参考资料 [1] 新编实用医学词典 [2] 汪浩川, 刘秉文, 傅明德. 天然和氧化修饰型脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞形态的影响[D]. , 1995. ...
培养基是为适合生物生长所需要的人工配制的混合物质养料,常用于微生物的分离、培养、鉴定、保藏和酿造、发酵等方面。具体成分根据生物营养需要而不同,一般含有水、碳水化合物、含氨物质和矿质盐类等。培养基可分为合成培养基和天然培养基,也可根据赋形剂的加入与否分为固体、半固体和液体培养基。 培养基的应用领域是什么? DMEM是dulbecco'smodifiedeaglemedium的缩写,是一种含有各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM相比,DMEM增加了各种成分的用量,并分为高糖型和低糖型。高糖型适用于生长较快、附着较困难的肿瘤细胞等。IDMEM是iscove'smodifieddulbecco'smedium的缩写,是DMEM的改进版,含有硒、氨基酸、维生素和丙酮酸钠等成分。研究表明,IDMEM适用于多种细胞培养,包括小鼠B淋巴细胞、来源于骨髓的造血组织细胞、LPS刺激的B细胞、T淋巴细胞和杂交细胞等。IMDM(1X)是一种液体培养基,含有L-谷氨酰胺、HEPES缓冲液和碳酸氢钠等成分。 主要参考资料 [1]中国卫生管理辞典 ...
试剂盒是一种将测定一种成分所需要的2种或2种以上的试剂及实验室一般用品连同操作说明书包装在一起,形成商品化的试剂单位,即由厂家提供给用户使用的一种套装试剂,使用者除用自备的蒸馏水或试剂盒提供的缓冲液进行复溶试剂的操作外不需要作任何试剂配制。目前检测试剂已广泛采用这一方式提供,kit的应用不但节约人力减少配制误差,而且有利于试剂质量的保证和实验室间方法学的统一,提高了可比性。 DNA浓缩试剂盒提供了一整套必需的试剂和方法,来有效浓缩各种低浓度DNA样品(包括显微解剖样品和石蜡包埋组织)中的DNA,只需要不到2分钟,就可以得到比别的试剂盒更好的浓缩产物。DNA浓缩试剂盒适用于各种样品中DNA的浓缩,尤其是低浓度的样品,比如显微解剖样品、石蜡包埋组织、限制酶切产物、PCR反应物以及人工合成的微量DNA产物。DNA浓缩试剂盒只需将DNA结合缓冲液加到待浓缩DNA样品里,经过DNA浓缩缓冲液处理之后,浆样品转移到试剂盒内专门设计的快速-旋转柱(Fast-SpinColumn)里,即可轻易将DNA回收到8-10ul体系里面。所得到的浓缩DNA可以用于随后的各种实验分析,该DNA浓缩试剂盒内主要产品组份包括:CA1(bindingbuffer)CA2(washbuffer)CA3(DNAelutionbuffer)F-spinColumnF-collectiontube。DNA浓缩试剂盒的特点为:1)最快速步骤的浓缩试剂盒,可在2分钟内完成;2)浓缩出的DNA有效去除了各种污染(包括盐.蛋白.酶.核酸和引物等);3)使用专利的结合缓冲液,无毒性试剂,不含酚氯仿。 主要参考资料 [1] 协和医学词典 ...
吡啶及其衍生物广泛地分布于自然界。许多植物成分如生物碱等的结构中都含有吡啶环化合物,它们是生产许多重要化合物的基础,是医药、农药、染料、表面活性剂、橡胶助剂、饲料添加剂、食品添加剂、粘合剂等生产中不可缺少的原料。2,6-二甲基-3、5-二溴吡啶是有机合成的重要中间体,主要用于医药中间体,有机合成,有机溶剂,也可应用于染料生产、农药生产及香料等方面。目前,已报道的2,6-二甲基-3、5-二溴吡啶的合成方法存在收率低、工艺路线长等缺点。 制备方法 2,6-二甲基-3、5-二溴吡啶的合成方法包括以下步骤: (1)以2,6-二甲基-3-氨基吡啶为原料,将2,6-二甲基-3-氨基吡啶和醋酐加到四口烧瓶中,升温至回流,薄层色谱跟踪反应; (2)等步骤(1)中的反应液温度降至23℃以下时,滴加液溴,滴完,40-55℃反应2-3小时,再向体系中加入水至所有固体溶解后,滴加氢氧化钠溶液,有大量沉淀生成再继续反应20-40分钟,抽滤,干燥,重结晶得到2,6-二甲基-3-氨基-5溴吡啶; (3)将2,6-二甲基-3-氨基-5溴吡啶加入溴化氢溶液中,在催化量的溴化亚铜存在下,滴加饱和亚硝酸钠溶液,温度控制在-3-4℃,反应2-3小时,得2,6-二甲基-甲基-3,5-二溴吡啶。 主要参考资料 [1]CN201711082545.1一种2,6-二甲基-3,5-二溴吡啶的合成方法 ...
药物转运体是存在于细胞膜上的膜蛋白,用于参与药物的跨膜转运。人体内有多种药物转运体,根据底物的跨膜转运方向可分为参与药物吸收和外排的两类。转运体可将药物摄取至细胞内的靶位,发挥药效,属于可溶性载体 (solutecarrier,SLC)。肝细胞摄取转运体主要分布于肝血窦侧细胞膜上,介导肝对外源性化学物质的摄取,影响药物在肝组织的浓度,进而可能影响药物的代谢和排泄。 肝细胞摄取转运体主要包括4个转运体家族,有机阴离子转运体(organic anion transporters,OAT)、有机阳离子转运体(organic cation transporters,OCT)、有机阴离子转运多肽(organic anion transporter polypeptides,OATP)和钠离子/牛磺胆酸共转运多肽(Na+-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)。以上转运体家族由可溶性载体(solute carrier,SLC)基因家族编码,并不涉及ATP-结合盒式蛋白(ATP-binding cassette,ABC)基因家族,也就是说以上转运体转运过程不直接需要ATP提供能量。小鼠肝细胞SLC转运体是转运体的一种。 如何进行相关研究? 研究者利用外翻肠囊法对小鼠肝细胞SLC转运体进行了系统研究,包括研究小鼠肝细胞SLC转运体的Na+依赖特性、抑制剂及Na+-K+-ATP酶在转运过程中的作用。研究发现,SGLT1是一种典型的继发型转运体,利用Na+进入细胞产生的电化学梯度引起细胞内葡萄糖蓄积,而Na+电化学梯度的产生和维持依赖于Na+-K+-ATP酶。该方法实验条件易控,操作简单,经济实用且重复性好,被广泛应用于转运体转运机制、营养物质吸收及药代动力学的研究。然而,由于缺乏体内肠蠕动状态、血液供应和消化道细胞代谢特性,用该方法所得的结果与体内生理状态仍存在一定偏差。 主要参考资料 [1] 药物转运体的研究方法...
2,4-戊硫醇二氧(杂)芑是一种含有羰基的有机化合物,通过醛、酮类化合物与羟胺反应生成,具有C=NOH基团。它可以形成肟类化合物,其中2,4-戊硫醇二氧(杂)芑二元肟是一种含有两个C=NOH基团的肟类化合物。 肟类化合物是一类配位能力较强的螯合配体,与金属离子形成的多核配合物是配位化学研究的热门领域。2,4-戊硫醇二氧(杂)芑配体具有两性配体的特性,能传递较强的磁交换作用,易形成同种多核或异种多核配合物以及配位聚合物。然而,由于合成及单晶培养方面的困难,多核配合物的数量远没有单核配合物的数量多。 近年来,2,4-戊硫醇二氧(杂)芑及其衍生物作为一类重要配体得到了快速的研究进展。尤其是丁二酮肟作为邻二酮肟中的典型代表已经得到广泛研究,但同属于邻二酮肟衍生物的2,4-戊硫醇二氧(杂)芑的金属螯合物的研究却相对较少。 应用 1. 制备2,4-戊硫醇二氧(杂)芑双核铜配合物: 将2,4-戊硫醇二氧(杂)芑与CuCl2·2H2O反应,经过加热搅拌回流和结晶得到绿色块状晶体。 2. 制备耐高压聚氨酯材料: 通过将环己二酮与尿素反应,得到环己基取代甘脲化合物。然后将环己基取代甘脲化合物与2,4-戊硫醇二氧(杂)芑、二月桂酸二丁基锡等组分反应,最终得到耐高压聚氨酯材料。 主要参考资料 [1] 赵志超, 王凯, 王振平, 杨春, 王庆伦, & 马越. (2015). 2,3-戊烷二酮二肟双核铜配合物的合成、结构与性质研究. 南开大学学报(自然科学版)(5), 27-32. [2] 孙绍发, 葛永华, & 王甘树. (2001). 丁二酮二肟的稀土金属配合物的合成及表征. 湖北科技学院学报, 21(3), 51-52. [3] 罗世能, 谢敏浩, 奚月芬, 冯瑛瑛, & 国毓智. (1993). ~(99m)tc标记环己二酮二肟及其甲基硼酸加成物和初步动物实验. 核技术(11), 687-689. ...
脱色剂是一种用于去除有色物质的化学物质。根据脱色原理,脱色剂可以分为絮凝脱色剂、氧化脱色剂和吸附脱色剂。絮凝脱色剂是一种多功能阳离子高分子化合物,可以同时实现脱色、絮凝和降解CODcr等功能。吸附脱色剂则通过活性炭、白土或吸附树脂的过滤作用,去除油品中的杂质和氧化物,使油品变成浅色透明的液体。氧化脱色剂则利用氧化性物质如次氯酸钠、高锰酸钾和臭氧,破坏有色基团以达到去除色度的目的。 如何制备脱色剂? 一种制备阳离子染料染色废水脱色剂的方法是将黑色水性油墨印花废液提取污泥、浮石颗粒和钙矿粉混合。具体制备方法如下:首先将黑色水性油墨印花废液酸析污泥调制成一定固含量的浆状,然后加入碱性物质中和至中性。接下来,将浮石颗粒和钙矿粉加入污泥中,搅拌均匀并调节污泥比重。然后,将污泥加热至50-90℃脱水,使其形成块状并排出水分。将块状污泥干燥至含水率低于50%后,隔绝空气加热至350-750℃保温1-5小时。最后,将污泥破碎成颗粒状,喷洒润湿剂溶液后混合均匀,即可得到脱色剂。 脱色剂的应用 脱色剂可以应用于多个领域,以下是两个应用举例: 1)印染污水处理:该方法包括预处理、碱性液的制备、污水的碱化、脱色剂的制备和脱色处理等步骤。通过设置粗栅格拦截印染废水中的悬浮物和漂浮物,并在脱色池中进行定时曝气,预处理印染废水。然后,制备碱性液并注入脱色池中,将pH值调至9-13。接下来,用高分子絮凝脱色剂制备脱色剂,并将其加入印染污水中进行脱色处理。最后,将废水的pH值调至6-7后,通过填充有海绵铁的过滤出口排出废水,完成最后的脱色处理。 2)食品级酶制剂生产:该方法利用复合脱色剂对发酵醪进行吸附脱色。复合脱色剂由粉末活性碳、活性白土和钠基膨润土组成。通过吸附脱色,可以提高产品的纯度和透明度,延长超滤膜的使用寿命,降低生产成本,并改善产品的色泽。在醪液脱色工艺中,先将复合脱色剂加入发酵醪中,然后进行一次过滤、二次过滤、超滤浓缩、配方、酶活力调整、精滤除菌除杂、分析检测和灌装等步骤,最终得到高质量的食品级酶制剂。 参考资料: [1] CN201610902387.9一种阳离子染料染色废水脱色剂及其制备和使用方法 [2] CN201710624645.6一种应用脱色剂处理印染污水的方法 [3] CN201110399247.1一种利用复合脱色剂生产食品级酶制剂的方法...
培养基是一种用于培养各种生物的基质或营养液,它提供了生物生长发育所需的营养物质、能源和适宜的pH环境。不同生物对于营养成分的需求各不相同,因此培养基的成分也有所差异。根据培养基中营养物质的来源,可以将培养基大致分为浸出液或天然培养基、合成培养基和半合成培养基。此外,根据培养的特定目的和用途,还可以有其他不同类型的培养基。 培养基的配制完成后,需要经过高压灭菌才能进行接种。培养基在生命科学的研究和应用中具有重要意义。例如,乳糖发酵培养基可用于大肠杆菌的发酵试验。乳糖发酵培养基的配方包括蛋白胨、乳糖和溴甲酚紫。蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长的需求;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫是pH指示剂,酸性呈黄色,碱性呈紫色。使用时,将30.0克本品加热溶解于1000毫升蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10毫升,进行115℃高压灭菌15分钟,备用。 主要参考资料 [1] 中国中学教学百科全书·生物卷 ...
 
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