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如何测定及制备氧化白藜芦醇? 1

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本文将介绍如何测定及制备氧化白藜芦醇,旨在为相关领域的研究人员提供参考依据。


背景:氧化白藜芦醇(oxyresveratrolE-23’,45-tetrahydroxystil bene,是二苯乙烯类化合物白藜芦醇的羟基衍生物。目前,氧化白藜芦醇的测定方法主要有高效薄层色谱法、高效液相色谱-紫外检测法、高效液相色谱-串联质谱法、气相色谱-质谱法和酶联免疫法。


1. 测定:

沈杰等人根据氧化白藜芦醇化学结构具有共轭系统,紫外光谱扫描在 329 nm有最大吸收,采用高效液相色谱-紫外检测法测定氧化白藜芦醇含量,并研究了经光照、高温、氧化、酸碱破坏后 的杂质与氧化白藜芦醇的分离情况,为氧化白藜芦醇含量测定提供参考。方法为:采用Agilent TC-C1 8 色谱柱(250 mm×4.6 mm5 μm),以乙腈-(30∶70)为流动相,流速为1.0 ml·min1,柱温为30℃,检测波长为329 nm,进样量为20μl。该方法在光照、 高温、氧化、酸碱破坏下,分离度良好,氧化白藜芦醇在19.28192.88μg·ml1范围内呈良好线性关系(r=0.999 7)。实验步骤为:


1)色谱条件:色谱柱为Agilent TC-C1 8 (250 mm×4.6 mm5μm);流 动相为乙腈-(30∶70);流速1.0 ml·min1;柱温30℃;检测波长329 nm;进样量为20μl


2)溶液的制备

空白溶液以流动相乙腈-(30∶70)作为空白溶液。


对照品溶液取氧化白藜芦醇对照品约25 mg,精密称定至50 ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液;精密量取上述对照品储备液5 ml,置25 ml 量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,得到氧化白藜芦醇浓度 为96.44μg·ml1的对照品溶液。


供试品溶液取氧化白藜芦醇原料约10 mg,精密称定至100 ml量瓶中,用流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。


3)系统适用性试验

在上述色谱条件下,分别进样空白溶液、对照品溶液和供试品溶液各20μl


2. 微生物转化法制备:

氧化白藜芦醇的微生物转化报道较少,目前李顺祥等利用黑曲霉菌SW-3301与鲜桑枝或桑根的皮共转化,得到氧化白藜芦醇,转化率可达95%以上。Park等同样也利用酶方法进行制备氧化芪三酚,先从桑树根中利用乙醇溶剂把桑皮苷(Mulberroside A)提取出来,再利用果胶酶水解桑皮苷得到 氧化芪三酚。这两种方法其实质都是以桑皮苷A为底物,目前桑皮苷A同样难以从植物中提取,且与氧化芪三酚的市场价相差不大,因而大规模工业化生产推广价值不大。


3. 氧化白藜芦醇纳米胶束的制备:

选取聚氧乙烯氢化蓖麻油 (RH40)为表面活性剂,甘油为保湿剂,制备OXYR胶束溶液。先将OXYR置于西林瓶中,加入表面活性剂RH40和无水乙醇,混合均匀后得醇相;将甘油溶入纯净水中,得水相;将醇相和水相混合,在70℃下恒温搅拌20 min后冷却至室温,然后加入一定量的质量分数为2%的透明质酸(HA)储备液,搅拌15 min,用纯净水补足余量即得胶束溶液。


参考文献:

[1]靳佳慧,马静,刘征辉等. 氧化白藜芦醇溶解性、油水分配系数和胶束制备及其透皮性能的研究 [J]. 时珍国医国药, 2019, 30 (07): 1615-1618.

[2]沈杰,徐志琴,吴倩华等. HPLC法测定氧化白藜芦醇的含量 [J]. 中国药师, 2019, 22 (03): 545-547.

[3]熊斯,周晋,唐敏等. 桑中氧化白藜芦醇的研究进展 [J]. 中医药导报, 2017, 23 (12): 101-104. DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2017.12.034

[4]孙洪宜,肖春芬,魏文等. 氧化白藜芦醇的合成 [J]. 有机化学, 2010, 30 (10): 1574-1579.

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