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荧光素的应用及特性? 1

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荧光素是一种具有光致荧光特性的合成有机化合物,可溶于乙醇,微溶于水。它在蓝光或紫外线照射下会发出绿色荧光。目前常用于标记抗体的荧光素有多种选择,如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明、四甲基异硫氰酸罗丹明等。荧光素在免疫荧光、免疫荧光染色实验中得到广泛应用。

荧光素的生物学特性

1、异硫氰酸荧光素(FITC)是一种小分子荧光素,其荧光效率受溶液pH值影响。FITC的分子量为389.4,最大吸收光波长为490~495nm,最大发射光波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光。

2、藻红蛋白(PE)相对分子质量较大,最大吸收峰为564nm,发射荧光峰值约为576nm。PE具有高荧光效率,并易与抗体分子结合。需要注意的是,不同来源的PE可能存在微小差异,导致特征不一致。

3、PI和EB是能嵌入到DNA和RNA的碱基对中并与之结合的荧光素。为了获得特异的DNA分布,染色前需处理细胞中的双链RNA。PI和EB可用于检测死活细胞,且在DNA和蛋白质双参数测量中更易于区分和测量。

4、除FITC和PE外,还有其他荧光素可用于单激光束三色荧光分析。这些荧光素在受到蓝光激发后发射出红色或深红色的光,如藻红蛋白-花青素、叶绿素蛋白或藻红蛋白-德克萨斯红。

总的来说,荧光素在生物学研究中具有广泛的应用前景。

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