荧光素是一种具有光致荧光特性的合成有机化合物,可溶于乙醇,微溶于水。它在蓝光或紫外线照射下会发出绿色荧光。目前常用于标记抗体的荧光素有多种类型,如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明等。荧光素在免疫荧光、免疫荧光染色实验中得到广泛应用。
下面介绍几种常用荧光素及其基本生物学特性:
1、异硫氰酸荧光素(FITC)是一种小分子荧光素,其荧光效率取决于溶液的pH值。FITC呈现明亮的黄绿色荧光,适用于切片标本中的荧光标记。
2、藻红蛋白(PE)具有高荧光效率,易与抗体分子结合。但其化学结构可能因来源不同而有微小差别。
3、PI和EB可嵌入到DNA和RNA的碱基对中并与之结合,用于特异的DNA分布检测。PI和EB还可用于检测细胞的存活状态。
4、单激光束三色荧光分析时,可选择发射不同波长的荧光素,如藻红蛋白-花青素、叶绿素蛋白或藻红蛋白-德克萨斯红。这些荧光素在受到蓝光激发后会发出红色或深红色的光。
荧光素的应用在生物学研究中具有重要意义,它们的特性和荧光效果使其成为标记和检测的理想工具。