内参出现这个情况，我觉得可以考虑一抗的问题，感觉一抗污染了，可以借用一点别的实验室的试试，我们用的Santa的还行。目的蛋白的话，如果你手法没问题，那这就是个难做的蛋白，建议查抗体附带的说明书，有的蛋白是不能用常规方式的，有的一抗不稳定，需要四度过夜，有的配抗体的缓冲液不同的，说明书一定要看，查里面的文章，参考条件，个人认为WB的条件应随蛋白变化，好做的无所谓，不好做的适当提高一抗二抗浓度，还有显影手法特别重要，你这个虽然糊了，但条带可见，还是有希望的，显的浅一点，看出变化，再考虑做的完美的问题。谢谢参考
