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链霉亲和素耐受有机溶剂吗?

我将生物素衍生上一个小分子,水不溶,溶于甲醇等有机溶剂,在孵育链霉亲和素和生物素时可以用用有机溶剂吗?他们还能结合吗?

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生物素与亲和素结合的能力PKa在十的十五次方以上,且他们两个的结合能力很强,而且酸、碱、变性剂、蛋白溶解酶以及有机溶剂均不影响其结合。我觉得:你要考虑的不是有机试剂破化他们结合,而是你的衍生小分子是溶于有机试剂的,会不会有影响。另外可以告诉你怎么可以断裂生物素和链霉亲和素之间化学键:1、将复合物置入PH=8.2、含95%甲酰氨的10 mM EDTA中 65°C孵育5分钟或90°C孵育2分钟,超过96%生物素化DNA片段均可被特异地分离。2、可将与磁珠相连的固化靶分子置于0.1%SDS中煮沸5分钟。
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