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无淀粉改良罗氏培养基的应用及研究进展? 1

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背景[1-3]

无淀粉改良罗氏培养基是一种用于结核杆菌分离鉴定的培养基。它由新鲜鸡蛋液、谷氨酸钠、甘油、孔雀石绿、磷酸二氢钾、硫酸镁和柠檬酸镁等组成。

分枝杆菌等痰液细菌在人工培养时,需要充足的营养成分。谷氨酸钠提供氮源,鸡卵液是良好的营养物质,同时还能降低脂肪酸的毒性。甘油和枸橼酸盐提供碳源,而钾、镁、磷、硫等无机盐是细菌生长所需的元素。磷酸盐具有缓冲作用。因此,无淀粉改良罗氏培养基为分枝杆菌提供了良好的生长环境。结核分枝杆菌是细长略带弯曲的杆菌,大小约为1~4X0.4μm。分枝杆菌则较为粗短。分枝杆菌细胞壁脂质含量较高,约占干重的60%,其中有大量的分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面,这会影响染料的穿透。一般使用齐尼抗酸染色法来染色分枝杆菌,经过5%石炭酸复红加温染色后,分枝杆菌会染上颜色,而用3%盐酸乙醇则不容易脱色。如果再使用美蓝复染,分枝杆菌呈红色,而其他细菌和背景物质呈蓝色。该菌没有芽孢和鞭毛。结核分枝杆菌最适生长温度为37℃,低于30℃时无法生长。由于结核分枝杆菌细胞壁脂质含量较高,影响了营养物质的吸收,因此生长速度较慢。在一般培养基中,每分裂1代需时18~24小时,而在营养丰富的情况下,只需5小时。

应用[4][5]

无淀粉改良罗氏培养基是一种固体培养基,被广泛应用于临床,用于培养结核分枝杆菌。它具有制作简便、价格低廉、便于观察菌落形态等特点。由于添加了孔雀绿等抑制普通细菌生长的物质,罗氏培养基上很少有普通细菌生长的报道。目前,对无淀粉改良罗氏培养基的进一步改良研究正在进行中。

参考文献

[1]A selective oleic acid albumin agar medium for tubercule bacilli.Mitchison,D.A.,B.W Allen,L.Carrol,J.M.Dickinson,V.R.Aber.J.Med.Microbiol.1972

[2]Diagnostic Methods in Tuberculosis.Ⅱ.Demonstration of M.tuberculosis by Culture.Cummings,M.M.Am.J.Clin.Path.1951

[3][Experience of disappearance of colonies,grown on Ogawa‘s 3%KH2PO4-egg yolk medium,which resemble colonies of Mycobacterium tuberculosis.].TOMITA T.Kekkaku.1958

[4][Experience of disappearance of colonies,grown on Ogawa‘s 3%KH2PO4-egg yolk medium,which resemble colonies of Mycobacterium tuberculosis.].TOMITA T.Kekkaku.1958

[5]于滨.对罗氏培养基进一步改良的初步研究[D].大连医科大学,2008.

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