本文将讲述阿齐沙坦酯合成中间体相关杂质的定性定量研究，希望能为评价阿齐沙坦酯及其中间体质量，优化阿齐沙坦酯合成工艺条件提供参考依据。
简述：阿齐沙坦酯（azilsartan medoxomil）是新一代选择性AT1亚型血管紧张素Ⅱ受体拮抗体，为阿齐沙坦 （azilsartan）的前药，通过临床实验研究证实，其具有平稳持久的抗高血压作用。2011年，经FDA的批准，阿齐沙坦酯以商品名为Edarbi上市。人们通常采用液相色谱法来测定阿齐沙坦酯的含量和纯度。
阿齐沙坦酯合成中间体相关杂质的定性定量研究：
1. 背景
阿齐沙坦酯有多种合成路径，下图是常用合成方法之一，在其合成过程中会不可避免地引入或生成相关杂质，这些杂质的成不仅降低了药物产率，而且可能对人体存在毒副作用。
2. 阿齐沙坦酯中间体中相关杂质的检测
目前，人们对阿齐沙坦酯中相关杂质的研究较少，对于中间体中相关杂质的检测也罕有报道。彭苗苗等人根据常用合成路径利用HPLC-MS等技术深入分析了阿齐沙坦酯及合成中间体1-4中的相关杂质。具体如下：
（1）三重四极液质联用条件
色谱条件：色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18（2.1×150 mm i.d.，5μm）；检测器：紫外检测；检测波长：254 nm；流速：0.8 m L/min；流动相A：H2O；流动相B：ACN：HAc=100：1；进样量：5μL。
质谱分析条件：ESI电离源，采用正离子检测模式；喷雾气：氮气，流速：15.0 psi；干燥气：氮气，流速：6.0 L/min；毛细管温度：270℃；毛细管电压：4000 V；质谱扫描范围：50-800 m/z；低真空：2.08 E+0 Torr；高真空：1.67 E-5 Torr。
（2）Q-Exactive液质联用条件
色谱条件：色谱柱：Thermo Scientific Hypersil GOLD C18（2.1×100 mm i.d.，1.9μm）；柱温：40℃；流速：0.2 m L/min；流动相B：H2O；流动相A：ACN：HAc=100：1；进样量：5μL。
质谱分析条件：电离模式ESI；扫描方式：正离子检测模式；鞘气压力：30 arb；辅助气压力：6 arb；毛细管温度：311℃；电离电压：3000V；质谱扫描范围：50-1000 m/z；前真空：1.39 E+0 mbar；超高真空：1.67 E-10 mbar。
（3）样品IP-1至IP-6的配制
准确称取1 mg样品于100 ml容量瓶中，用H2O: ACN=1:1的混合溶剂溶解并定容，最终配制的样品浓度为1 mg/mL。精确稀释样品，在0.01μg/mL-2μg/mL之间配置5个或6个浓度梯度的样品溶液并用0.2 μm滤膜过滤备用。
（4）结论
通过HPLC技术，成功实现了对阿齐沙坦酯及其合成中间体与相关物质的有效分离。随后，利用HPLC-MS联用技术，在阿齐沙坦酯及其合成中间体中检测到了6个主要杂质。通过二级质谱推测了这些杂质的结构，并通过液相相对保留时间进行了验证。该研究创立了一种新的检测方法，用于检测阿齐沙坦酯及其合成中间体中的相关杂质。实验结果表明，该方法不仅能够获得良好的峰形和合适的出峰时间，而且具有良好的选择性和高灵敏度，线性关系较好（R2>0.992）。在线性范围内，检测限仅为0.01-0.1μg/mL，远低于相关文献报道的0.08-10μg/mL。
参考文献：
[1]彭苗苗. 沙坦类化合物的质谱学研究以及阿齐沙坦酯合成中间体相关杂质的定性定量研究[D]. 郑州大学, 2016.
[2]彭苗苗,郭艳春,曹书霞等. 利用反相HPLC与ESI-MS联用技术分离阿齐沙坦酯药物[C]// 中国化学会. 中国化学会第29届学术年会摘要集——第38分会：质谱分析. 郑州大学化学与分子工程学院 河南省化学生物与有机化学重点实验室;福建省化学生物重点实验室厦门大学化学化工学院;, 2014: 1.
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