各位前辈,本人初入研发,做到有关物质定位时,出了些问题,我用的色谱条件是
原料药标准中异构体的HPLC测定条件,然后拿了原料药合成后三步的
中间体以与异构体测定法中要求制成供试品进样,结果原料药能出原料主峰和异构体的峰,但相同条件下中间体却没有出峰(1ml的流速走了近一个小时都没出峰,原料药与异构体是30min左右出的峰),流动相是乙腈:水(3:2),后来增大乙腈比例为(4:1),流速调到1.8ml,走了40min还是没出峰,想问一下前辈和高手们,问题出在哪,中间体的波长都做了扫描,中间体的最大吸收波长基本都在所用波长附近。柱子是C18柱,是不是柱子的原因,本身就无法分离中间体呢,我看了一下中间体的结构,中间体的结构中都比原料药多了一个TBS的基团(
叔丁基二甲基硅烷),其他都差不多,会不会跟这个基团有关系呢,一般像这样的基团,有什么柱子能分析出来呢,谢谢各位前辈帮我支支招,谢谢啦!!