去掉信号肽？

要不要加看你的克隆策略。比如如果你不是克隆在NcoI酶切位点，而是后面的位点，那么只需要注意不要移码就行。如果是克隆在NcoI（我记得是RBS后面的第一个酶切位点？），因为Ncoi本身有一个ATG，所以你如果用Nco I，也不用再加一个ATG。

载体上的Ndei和Ncoi酶切位点上不是有吗？难道你要用无缝克隆方式？酶切连接的话就没问题。无缝克隆的话柳絮要加上。

总之，都不用加。