有用HPLC大神吗？求帮助？

B相浓度从3到20％变成了3到10％，但是标准品的峰基本上没有后移多少

你得仔细说说才行啊，一般情况下，你搞错了管路了，或者峰指认错误了

1. 看看是不是K<2, 保留小于两倍的死体积，如果保留弱，基本要换体系或者柱子了；
2. 该样品对于B相溶剂不敏感，可以换一种有机溶剂试试，甲醇、乙醇、二氧六环、四氢呋喃都可以试试。